得克隆对MCF-7细胞蛋白表达谱的影响

来源 :大连海事大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lian2008bang
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得克隆(Dechlorane Plus, DP)是一种使用量巨大、广泛地存在于各种环境和生物介质、具有生物富集性的氯代阻燃剂。DP的毒理效应及作用机制研究非常有限。本课题组前期研究发现,DP可诱导人乳腺癌细胞MCF-7的增殖,并对雌激素受体及MAPK/ERK通路相关基因的表达产生影响。本论文采用蛋白质组学的研究方法,对DP暴露后的MCF-7细胞的蛋白表达谱进行分析,进一步挖掘DP毒性效应及内分泌干扰作用的可能分子机制,为DP生物毒性和生态风险的评价提供科学依据。差异蛋白质组分析表明,10-6M DP暴露处理96小时后的MCF-7细胞与对照组相比,蛋白表达谱发生明显改变,共获得52个差异表达(≥1.5倍)的蛋白点。经统计学分析后,共23个蛋白点具有显著性差异(p≤0.05)。其中,表达上调的蛋白点14个,表达下调的蛋白点9个。选取上述23个蛋白点进行MALDI-TOF MS/MS串联质谱分析,鉴定出其中的10个蛋白点。这些蛋白点分别为热休克蛋白27和60、碱性肌球蛋白轻链的两个异构体、核糖核苷二磷酸激酶B、60S酸性核糖体蛋白P2、肽酰脯氨基顺反异构酶A、前纤维蛋白-1、鸟嘌呤核苷酸交换因子5和原钙黏蛋白a9前体。进一步的生物信息学分析显示这10个蛋白主要参与了细胞过程、生物学调控、对外源刺激的响应、代谢和发育过程、以及信号和免疫等生物学过程。选取热休克蛋白60进行了mRNA和蛋白水平的定量分析,其在DP暴露处理后的变化趋势与蛋白质组分析的结果一致,说明本研究发现的差异表达蛋白质可用于后续DP生物毒性效应的分子机制研究。
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