【摘 要】
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目的 脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)是一种继发于高能量创伤的中枢神经系统疾病,常伴随着脊柱的骨折与脱位,对其的治疗研究一直是国内外研究的热点问题,如何桥接脊髓断端
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目的 脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)是一种继发于高能量创伤的中枢神经系统疾病,常伴随着脊柱的骨折与脱位,对其的治疗研究一直是国内外研究的热点问题,如何桥接脊髓断端并促进轴突的再生是问题的关键所在。神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)是一类存在于中枢神经系统内具有多向分化能力的细胞,可分化为神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞等。有研究表明神经干细胞移植后可在脊髓损伤区域存活、分化及整合,但促进脊髓损伤修复的作用机制尚不够清楚。本研究共分三部分,拟探讨神经干细胞分化过程中突起生长,以及细胞移植治疗脊髓损伤的作用机制。 第一,分离、培养新生大鼠海马源性的神经干细胞,加入碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、胰岛素样生长因子,诱导神经干细胞向神经元方向分化,探讨此过程中生长相关蛋白43(GAP-43)的表达变化及意义。 第二,制作大鼠脊髓损伤模型,于伤后第7天将5溴脱氧尿苷(Brdu)标记的神经干细胞移植到脊髓损伤区,并以辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪,探讨脊髓轴浆运输的恢复情况。 第三,在神经干细胞移植术后不同时间点,通过免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等方法对生长相关蛋白43(GAP-43)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因的表达进行检测,探讨神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤的修复机制。 材料与方法 1.Wistar大鼠海马源性神经干细胞的分离、培养与分化,神经干细胞的标志物神经巢蛋白(Nestin)的检测和神经元的标志物特异性稀醇化酶
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