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目的：
多不饱和脂肪酸(PUFA)及其下游代谢产物可参与到炎症的发生、发展整个病理过程。本文拟采用改良的甲酯化红细胞膜脂肪酸气相色谱分析法,分析和探讨红细胞膜脂肪酸组成及其代谢在哮喘患者与正常人间可能存在的某些差异以及这些差异是否与哮喘疾病相关;采用酶联免疫法分析测定血浆中与炎症相关的6种PUFA代谢产物包括PGE2,TXA2,LTB4,PGE1,PGF1α和PGF2α的浓度,分析和探讨炎症相关脂类介质在哮喘患者与正常人间可能存在的差异。
方法：
1.从广东医学院附属医院呼吸内科收集哮喘病人血液样本,从湛江血站收集正常人血液样本。取病例组和正常对照组的血液样本各31例用于以下研究。
2.提取血液红细胞膜的脂肪酸,采用改良的甲酯化脂肪酸气相色谱分析法测定脂肪酸的种类及含量,并分析脂肪酸与胆固醇和血浆脂蛋白的相关性;分别采用相应的ELISA试剂盒检测病例组与正常组血浆中6种脂类介质PGE2、TXA2、LTB4、PGE1、PGF1a和PGF2a的浓度。
3.采用SPSS13.0对两组分析数据进行方差齐性检验和T检验。
结果：
1.红细胞膜脂肪酸抽提甲酯化改良法测定脂肪酸显示病例组总ω-6 PUFA和总ω-3 PUFA的含量百分比与正常组都显著性差异(P＜0.01),ω-6 PUFA/ω-3PUFA比值两组间也有差异显著(P＜0.05);ω-6 PUFAs中,花生四烯酸(AA)含量百分比两组间有差异(P＜0.05);在ω-3 PUFAs中,两组二十碳五烯酸(EPA)所占百分比无差异(P＞0.05),二十二碳六烯酸(DHA)有差异(P＜0.01);此外,两组间的C24:0 PUFA饱和脂肪酸也存在差异(P＜0.01)。
胆固醇和血浆脂蛋白LDL-CH、VLDL-CH、TG、HDL-CH与ω-6 PUFA/ω-3 PUFA比值有一定的相关性,但相关性都非常低,最高的为LDL-CH(R2=0286)。
2.ELISA检测结果显示,ELISA检测的6种脂类介质中,病例组PGE2、TXA2、PGE1病例组的浓度都比正常组高(P＜0.01),LTB4、PGF1a、PGF2a的浓度两组间无差异(P＞0.05)。
结论：
1.哮喘患者和正常人红细胞膜脂肪酸组成都主要由C16:0、C18:0、C18:1、C18:2(ω-6)和C20:4(ω-6)脂肪酸组成;病例组脂肪酸含量由低到高依次为饱和脂肪酸(SFA)、PUFA、单不饱和脂肪酸(MUFA)(含量依次为41.70％、38.05%、20.26%),正常组中依次为PUFA、SFA、MUFA(含量依次为42.86%、37.84%、19.29%);哮喘患者红细胞膜上PUFA的比例较正常人体的低,提示哮喘可能与患者体内PUFA代谢改变有某种关联。
2.哮喘患者的ω-6 PUFA/ω-3 PUFA比值为(4.42±1.33:1)%,明显高于(P＜0.01)健康人的(3.21±0.79:1)%,提示ω-6 PUFA/ω-3 PUFA比值升高不仅可诱发心血管疾病、胃肠病、免疫疾病、神经系统发育不全以及癌症等疾病,而且还可能可以诱发哮喘。
3.病例组的C24:0 SFA的百分含量为(6.21±1.55)%,显著高于(P＜0.01)正常组的(4.24±1.03)%,提示哮喘患者体内可能催化C22:0 SFA延长为C24:0SFA的长链脂肪酸延长酶的活性高于正常人,或C24:0长链脂肪酸代谢酶活性低于正常人,这是否与哮喘体质问存在某种关联有待进一步研究。
4.哮喘与胆固醇及脂蛋白的相关性分析显示CHOL、LDL-CH、VLDL-CH、TG、HDL-CH与ω-6 PUFA/ω-3PUFA有一定的相关性,但相关性都非常低。LDL-CH与ω-6 PUFA/ω-3PUFA的相关性最高,R2=0.0286,其次为总CHOL与ω-6 PUFA/ω-3PUFA的相关性为0.0221,再次分别是VLDL-CH、TG、HDL-CH分别是0.017,0.0163,0.0058。
5.在所测定的6种PUFA代谢产生的脂类介质中,PGE1、POE2、TXA2在病例组的浓度比正常组高(P＜0.01);LTB4、PGF1α、PGF2α的浓度在两组间的差异不明显(P＞0.05),提示哮喘可能与部分PUFA代谢产生的脂类介质如POE2、TXA2、PGE1的含量相关。