目的:脑胶质瘤是中枢系统中发病率最高的恶性肿瘤,约占颅内恶性肿瘤的80%。脑胶质瘤的恶性程度极高,其细胞增殖能力、侵袭和迁移能力强。经过标准方案治疗后,脑胶质瘤患者的中位生存期低于18个月,5年生存率不足5%。因此,探求脑胶质瘤治疗的新靶点来延长患者的生存期引起了广泛的关注。包含SH₂结构域的蛋白质酪氨酸磷酸酶2（SH₂ domain-containing protein tyrosine phosphatase-2,SHP-2）是酪氨酸激酶家族的成员之一,并在人的多种组织、器官和细胞中广泛表达,参与胚胎发育、细胞增殖、细胞分化和细胞粘附等细胞生物学过程,不仅如此,在肿瘤生物学上,SHP-2激活突变与恶性肿瘤的发生发展有着密切相关性。然而,目前关于SHP-2激活突变与脑胶质瘤的研究较少,因此,本研究旨在探讨SHP-2激活突变在脑胶质瘤组织中的程度及其与脑胶质瘤患者的临床病理学特征以及免疫组化的关联,体外细胞实验上探讨该突变位点促进脑胶质瘤恶性生物学行为及其可能的机制。接下来在体内小鼠实验上进一步探讨SHP-2^D61G突变的作用。方法:入组病例选择:收集新疆医科大学第一附院神经外科和新疆医科大学第四附属医院神经外科2015.9～2016.6经手术切除的脑胶质瘤患者标本45例,所有患者均经病理确诊,另取15例因脑挫裂伤行正常脑组织切除患者的标本为对照组,研究所取标本均经我院伦理委员会批准。入选标准:⑴纳入的45例脑胶质瘤患者均为初次入院,在术前未进行过化疗、放疗;⑵石蜡切片质量良好;⑶临床病理资料完整;⑷所有肿瘤均术后病理确诊为脑胶质瘤。SHP-2^D61G突变检测:先提取组织切片的DNA,然后用微滴数字PCR进行突变位点检测。评估对照组和脑胶质瘤组织中SHP-2^D61G突变差异;评估不同级别脑胶质瘤组织中该位点突变差异;将该突变位点与脑胶质瘤患者临床病理特征进行相关性分析。免疫组化染色来检测正常组织和脑胶质瘤组织中SHP-2的表达。体外培养人神经胶质瘤细胞株U251,构建pcDNA3.1空载质粒和pcDNA3.1 SHP-2^D61G突变质粒并分别转染U251细胞株。G418筛选稳定表达SHP-2^D61G突变的U251细胞株:通过设置不同浓度的G418处理转染后的U251细胞,选择让正常未转染细胞死亡的最小浓度为理想浓度。Western blot检测G418筛选后细胞中SHP-2的表达。MTT法检测细胞活力的改变。平板克隆实验检测细胞的克隆形成能力。流式细胞凋亡实验对凋亡细胞进行计数。Transwell侵袭实验检测目标肿瘤细胞的迁移和侵袭能力。蛋白质免疫印迹法（Western blot）评估ERK1/2、AKT和p38及其磷酸化水平的改变。分别用p38 MAPK通路抑制剂（SB203580）、MEK通路抑制剂（U0126）和PI3K-AKT通路抑制剂（PF-04691502）处理转染后的细胞,然后用western blot检测ERK1/2、AKT和p38及其磷酸化水平的改变。构建表达SHP-2^D61G突变的慢病毒质粒载体和空载质粒,并将质粒通过慢病毒包装分别转染进脑胶质瘤细胞U251中,筛选稳定表达SHP-2^D61G突变和空载质粒的细胞。在SPF环境下饲养C57BL/6J小鼠,将筛选后的细胞分别接种在小鼠的皮下成瘤,同时设置未转染的细胞接种组为对照。每日测量小鼠的体重变化,绘制体重变化曲线;小动物成像系统观察小鼠的成瘤大小。记录小鼠死亡的时间,绘制生存曲线。结果:对照组和脑胶质瘤组组织中SHP-2^D61G突变丰度分别为0和3.36±1.08（%）。SHP-2^D61G突变与脑胶质瘤分级有关,分级越高,该位点突变丰度越高（P<0.05）。SHP-2^D61G突变与患者的性别、年龄和肿瘤位置无关,但是与肿瘤大小有关（P<0.05）。脑胶质瘤组织中SHP-2染色比正常组织深,且SHP-2^D61G突变阳性的脑胶质瘤患者比SHP-2^D61G突变阴性的患者染色深。与对照组相比,转染pcDNA3.1SHP-2^D61G突变质粒的细胞中SHP-2表达升高。转染pcDNA3.1 SHP-2^D61G突变质粒的U251细胞活力增强。SHP-2^D61G突变提高了U251细胞的克隆形成能力。SHP-2^D61G突变降低了U251细胞的凋亡数量。SHP-2^D61G突变促进了U251细胞的侵袭能力。SHP-2^D61G突变使U251细胞中p38、ERK和AKT的磷酸化水平升高。用通路抑制剂处理转染后的细胞,p38、ERK和AKT的磷酸化水平下降与对照组相比,在接种后5天内,体重差异无统计学意义,在接种后第6天,SHP-2^D61G突变组的小鼠的体重变化明显升高（P<0.05）。生存分析显示与对照组相比,SHP-2^D61G突变组的小鼠的生存时间明显缩短（P<0.01）。结论:正常脑组织中无SHP-2^D61G突变,而脑胶质瘤组织中存在该突变位点。脑胶质瘤中的SHP-2^D61G突变与恶性肿瘤分级和肿瘤大小有一定关联,分级越高,突变丰度越高,相应的肿瘤直径越大。SHP-2在脑胶质瘤组织中高表达,并且SHP-2^D61G突变促进了SHP-2的激活。SHP-2^D61G突变促进了人神经胶质瘤细胞的恶性生物学行为（凋亡、增殖、侵袭、克隆）。SHP-2^D61G突变可能通过激活p38、ERK1/2和AKT信号通路促进了恶性生物学行为。SHP-2^D61G突变是一个潜在的治疗脑胶质瘤的靶点。SHP-2^D61G突变促进了脑胶质瘤细胞在体内的增殖和生长。脑胶质瘤患者中SHP-2^D61G突变也许会缩短患者的生存时间。