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本文是关于里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C-30纤维素酶的分离纯化及其酶学性质的研究。使用超滤、DEAE-Sepharose FF弱阴离子交换层析、CM-Sepharose FF弱阳离子交换层析和Sephadex G-100凝胶柱层析等分离技术,从里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C-30发酵产的纤维素酶粗酶液中分离纯化出三种内切葡聚糖酶组分(EGⅠ、EGⅡ、EGⅢ),两种外切葡聚糖酶(CBHⅠ、CBHⅡ)和一种β-葡萄糖苷酶(GB)。这六种组分经电泳鉴定均为单一组分。六种组分中内切葡聚糖酶组分EGⅠ、EGⅡ、EGⅢ对羧甲基纤维素的比活力分别为176.35、153.96、64.22 IU·mg-1;外切葡聚糖酶组分CBHⅠ、CBHⅡ对微晶纤维素的比活力分别为16.86、4.82 IU·mg-1;β-葡萄糖苷酶GB对水杨苷的比活力为31.00 IU·mg-1。对纯化得到的纤维素酶组分的基本酶学性质进行了研究。SDS-PADE电泳测得六种纤维素酶组分EGⅠ、EGⅡ、EGⅢ、CBHⅠ、CBHⅡ、GB的分子量分别为50、46、25、65、58.1、75kD。动力学方法测得EGⅠ、EGⅡ、EGⅢ对羧甲基纤维素的Km值分别为6.70、8.46、13.22 mg/mL; CBHⅠ、CBHⅡ对微晶纤维素的Km值分别为1.37、3.46 mg/mL;β-葡萄糖苷酶GB对水杨苷的Km值为2.20 mg/mL。六种纤维素酶组分EGⅠ、EGⅡ、EGⅢ、CBHⅠ、CBHⅡ、GB的最适反应温度分别为55、50、55、60、45、60℃;最适反应pH分别为5.6、4.4、5.0、5.6、5.0、5.0。本文同时研究了纤维素酶组分的热稳定性和酸碱稳定性。在低于室温的条件下,六种纤维素酶组分都有很好的热稳定性,可以在较长的时间内保持酶活几乎不受损失,六种酶组分都不耐受80℃以上的高温,在高于80℃的环境中,酶蛋白易变性,丧失活性。在pH5.0~6.2之间时六种纤维素酶组分具有很好的稳定性;葡苷酶GB的酸碱稳定性是六种酶组分中最差的,只能在pH5.0的环境中长时间保持保持酶活不变;内切葡聚糖酶EGⅠ和外切葡聚糖酶CBHⅠ是六种酶组分中稳定性最好的,在接近于中性的条件下(pH6.8)这两种酶处理5.0h后都可以保留91.1%以上的酶活性。