转BMP7基因组织工程软骨的构建与移植修复兔膝关节软骨缺损

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采用RT-PCR 技术从体外培养的幼兔膝关节软骨细胞中克隆得到BMP7 基因;并将该基因克隆入pcDNA3.1 真核表达载体,构建了重组pcDNA3.1-BMP7质粒;在脂质体介导下将该重组质粒转染入成年兔关节软骨细胞,通过实验证明了BMP7 基因在软骨细胞中表达BMP7mRNA 和BMP7 蛋白。应用转BMP7 基因软骨细胞,以胶原-纤维蛋白凝胶为支架构建了转BMP7基因组织工程软骨。转BMP7 基因组织工程软骨中细胞分裂、增殖速度快,细胞器发达,细胞外基质合成增多,DNA 与GAG 含量增高,BMP7 基因表达的目的蛋白具有生物活性。分析了与其同步构建的未转BMP7 基因组织工程软骨的生物学差别。确定了转BMP7 基因组织工程软骨的移植修复时间。通过组织工程和基因工程技术相结合,将构建的转BMP7 基因组织工程软骨移植到模型动物兔膝关节软骨缺损处,BMP7 基因能在移植部位表达活性BMP7 蛋白,加速了关节软骨缺损的修复。开创了转基因组织工程软骨促进关节软骨缺损修复的新领域。为其应用于临床奠定了基础。
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