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目的: 宫颈癌在女性恶性肿瘤中位居全球第二,每年新发宫颈癌病例530000例,死亡274000例.高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)持续感染是宫颈癌及其癌前病变(重度宫颈上皮内瘤变,CIN2/3)发生的主要病因.宫颈癌组织中HPV病毒检出率高达99%,通过对HPV病毒筛查,可预测宫颈癌的发病风险.但是,宫颈癌筛查的目的并非单纯地检测HPV病毒,而是要发现更多癌前病变(CIN2+及原位癌),从而降低宫颈癌的发病率和死亡率.本课题旨在分析浙江台州地区女性宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染率以及基因亚型的分布特征,并研究高危HPV基因分型在宫颈病变筛查中的临床应用价值. 方法: 1. 宫颈脱落细胞取样步骤和要求按宫颈细胞学取材常规进行,扩阴器暴露宫颈口,棉拭子擦去分泌物,宫颈刷顺时针刷转3-5圈,采集标本置于专用细胞保存液的小瓶中,密封,4℃保存待检,24小时内检测. 2.通过GP5+/6+PCR-Luminex xMAP技术对女性宫颈脱落细胞中的HPV病毒进行DNA分型.Luminex200多功能液相芯片分析仪(Luminex公司,美国)读取HPV 基因分型结果,包括14种高危型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68)和12种低危型(HPV06、11、26、40、42、44、53、55、61、73、82、83). 3.经ThinPrep2000检测系统程序化处理制成均匀的薄层细胞片,95%酒精固定染色阅片,采用2001年TBS分级报告系统,对宫颈脱落细胞进行薄层液基细胞学检查. 4.HPV阳性者和/或细胞学异常者均行阴道镜检查,醋酸实验可疑病变区取多点活检,若正常则常规行3、6、9、12点活检.宫颈CIN病理分级: ①正常/宫颈炎; ②宫颈湿疣/CIN1级; ③CIN2级; ④CIN3级/原位癌CIS; ⑤宫颈浸润癌. 以病理诊断结果CIN1级及以上病变定为病理学异常. 5.以宫颈组织病理学诊断结果为金标准,采用敏感性等标准评价高危HPV基因分型在宫颈病变筛查中的临床应用价值.采用 SPSS16.0 软件对所得资料进行统计分析,组间率的比较用卡方检验,P<0.05为差异有统计学意义. 结果: 1. 浙江台州地区HPV总感染率22.8%,单一型感染率17.2%,多重感染率5.6%.高危型、低危型和混合感染率分别为14.2%,5.7%,3.0%.HPV阳性按感染率从高到低依次为HPV52(19.7%)、HPV16(11.9%)、HPV58(11.5%)、HPV39(7.2%)、HPV18(6.6%)和HPV56(5.6%). 2.宫颈HPV多重感染率为5.6%,其中HPV52+58,HPV16+52和HPV16+18混合感染在多重感染者中最为常见.HPV感染率在不同年龄段女性中显示双峰曲线,第一个峰值低于 21 岁(41.6%),第二个峰值出现在 56-60 岁年龄组(28.5%), 3.门诊组和体检组女性HPV感染率存在显著差异(24.0% vs. 19.5%, P<0.0001),进一步数据分析显示,两组间的HPV基因型分布也存在差异. 4.关于宫颈上皮内瘤变2级及以上(CIN2+)异常组织的检出率,hrHPV基因分型策略和传统的细胞学、HPV 病毒共筛查策略的敏感性分别为 93.5%和71.1%,特异性分别为17.5%和62.4%. 5.传统的宫颈癌筛查策略对CIN2+病例的阳性预测值(28.4%)略高于hrHPV基因分型策略(21.9%),而 hrHPV 基因分型策略的阴性预测值(94.7%)比传统的宫颈癌共筛查策略更高(91.1%) .与HPV35/39/45/51/56/59/66/68感染者相比,HPV16/18/31/33/52/58感染女性发生CIN2+病变的优势比(OR)为3.2(95% CI:2.3-4.1). 结论: 1. 浙江省台州地区女性宫颈 HPV 型别的流行病学数据对宫颈癌筛查工作具有重要意义,并支持台州地区的疫苗接种计划,促进 HPV 相关疾病的诊断和治疗. 2.高危HPV基因分型在宫颈癌筛查中的敏感性显著高于细胞学检查,可作为细胞学结果可疑或轻度异常者的随访分流.hrHPV 基因分型策略提供了比HPV16/18 更好的预测指标,可有效指导宫颈癌筛查的临床管理.将高危HPV基因分型检测作为单独的宫颈癌初筛手段,具有足够的诊断敏感性.