盐胁迫下内源ROS的产生及其互作对小麦幼苗生理生化特性的影响

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高盐胁迫产生的离子毒害和氧化损伤对植物的生长发育造成不利影响,导致农作物减产,制约农业生产和农民生活水平提高。一氧化氮(Nitric oxide,NO)和活性氧(Reactive oxygen species,ROS)作为调节植物响应逆境胁迫过程中的关键信号分子,位于胁迫信号转导的中心环节,共同参与调控植物的多种生理生化反应。本实验以小麦(Triticum aestivum L.)‘西旱3号’为材料,通过添加3-氧代-2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-1-氧(2-phenyl-4,4,5,5,-tetramethylimidazoline-3-oxide-1-oxyl,PTIO)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)和二联苯碘(Diphenylene iodonium,DPI)研究了盐胁迫诱导产生的NO和ROS调节小麦幼苗生长、Na、K、Ca含量及抗氧化防御体系,试图探明NO与ROS调节小麦适应盐胁迫的作用及其机理,主要研究结果如下:1.50 mmol·L-1 Na Cl处理促进了小麦幼苗的生长,而150 mmol·L-1 Na Cl处理抑制了小麦根、叶的生长。添加PTIO(NO清除剂)或CAT(H2O2清除剂)部分缓解了150mmol·L-1 Na Cl对小麦幼苗生长的抑制效应,而Na Cl+DPI(质膜NADPH氧化酶抑制剂)处理对小麦幼苗生长的抑制效应最为明显。2.盐胁迫使小麦幼苗中Na含量增加而Ca含量减少,K/Na值降低。50 mmol·L-1 Na Cl处理使根中K含量减少而叶中K含量增多,PTIO、CAT或DPI的加入导致150mmol·L-1 Na Cl处理下小麦根中Na和Ca含量减少而叶中其含量增多;添加PTIO或CAT增加了小麦根中K含量而DPI使其含量降低,这三种试剂均增加了150mmol·L-1 Na Cl处理下幼苗叶的K含量。3.盐诱导了小麦根尖NO的产生,50 mmol·L-1 Na Cl处理使根中一氧化氮合酶(Nitric oxide synthase,NOS)类似蛋白活性降低,而150 mmol·L-1 Na Cl使该酶活性增强。PTIO或CAT减弱了单盐处理下根尖NO荧光强度及NO含量,却刺激了NOS类似蛋白活性,而Na Cl+DPI处理使小麦根中NO积累和NOS类似蛋白活性均达到最大。4.盐胁迫使小麦根中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量和总的及质外体ROS含量增加。与150 mmol·L-1 Na Cl单独处理相比,PTIO的加入伴随着MDA和总ROS含量的降低及质外体过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)、超氧阴离子(Superoxide onion,O2??)的减少和羟自由基(Hydroxyl radical,·OH)的增加,添加CAT有效地抑制了盐胁迫下小麦根中MDA和总ROS含量,提高了质外体O2??含量,而DPI的加入降低了小麦根中总的H2O2及·OH的含量,同时抑制了根质外体O2??的产生,但增加了MDA、总O2??含量及质外体H2O2和·OH的含量。5.盐胁迫使小麦根中总的及质外体超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、CAT和质外体谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase,GR)活性增强,总过氧化物酶(Peroxidase,POD)、抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase,APX)和GR及质外体POD和APX活性降低。较150 mmol·L-1 Na Cl单独处理相比,Na Cl+PTIO处理导致了小麦根中总SOD、POD、CAT和APX以及质外体SOD、POD和GR活性显著降低,但促进了总GR及质外体CAT活性。外源CAT的加入降低了盐胁迫下小麦根中总SOD、POD及质外体POD和GR活性,而增强了总APX及质外体SOD、APX活性。DPI的加入促进了单盐胁迫下小麦根中总SOD、APX和GR活性,但有效抑制了质外体SOD、POD、CAT和GR活性。6.盐胁迫抑制了小麦幼苗根中细胞壁过氧化物酶(Cell wall-bound POD,cw-POD)、二胺氧化酶(Diamine oxidase,DAO)和多胺氧化酶(Polyamine oxidase,PAO)活性,PTIO或CAT的加入抑制了150 mmol·L-1 Na Cl处理下小麦根中cw-POD活性,却显著增强了DAO和PAO活性,DPI的加入使150 mmol·L-1 Na Cl处理下小麦根中cw-POD、DAO和PAO活性均显著增强。总之,低浓度的盐促进了小麦幼苗的生长,而高浓度的盐抑制了小麦幼苗根、叶的长度;不同浓度的Na Cl处理使小麦幼苗中Na含量增加而Ca含量减少,K/Na值降低;盐胁迫诱导小麦根中NO的产生与ROS的积累相互影响,并可能共同调控小麦幼苗在盐胁迫响应过程中根对Na、K、Ca的吸收及其向地上部分的转运,且相互作用调节Na Cl处理下小麦幼苗根中总的及质外体抗氧化酶活性,维持植物体内离子含量和氧化还原平衡,减轻盐胁迫对小麦幼苗的伤害。
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