目的 诱导白血病细胞凋亡是治疗白血病的策略之一,寻找低毒高效的白血病细胞凋亡诱导剂尤显迫切。而对肿瘤凋亡机制的深入研究,可深化人们对凋亡机制的了解,引发人们对许多疾病发生、发展进行新的思考。本课题首先证明氨基葡萄糖硫酸盐(Glucosamine sulphate,GS)能诱导慢性髓系白血病K562细胞凋亡,进而探讨组织蛋白酶(Cathepsin)D的活性变化与Bcl-2家族蛋白在该凋亡过程中可能的关系。方法 倒置显微镜下动态观察加氨基葡萄糖硫酸盐前后细胞生长变化情况。瑞氏—姬姆萨染色及电镜等观察细胞加药前后的形态学变化。利用细胞计数、流式细胞仪、DNA梯状电泳观察GS对K562细胞的抑制效应和促凋亡作用。间接免疫荧光法观察氨基葡萄糖硫酸盐(GS)诱导K562细胞凋亡过程中组织蛋白酶(Cathepsin)D和细胞色素(cytochrome)C的转位情况。Western blot法检测K562细胞凋亡过程中CathepsinD、caspase-3、Bcl-2、Bcl-xL、Bax、Bid蛋白的表达变化。结果 ①0.5、1、5mmol/LGS对K562细胞的生长有抑制作用,并具有时间和剂量依赖性。②5mM氨基葡萄糖硫酸盐作用K562细胞72小时后,细胞增殖受到明显抑制,胞浆出现空泡化。③GS作用K562细胞72小时Annexin V染色后流式细胞仪能检测到早期凋亡细胞,细胞周期显示:G1期细胞比例增高,S期减低,并有凋亡峰。