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目的：研究中药复方益骨汤含药血清对体外培养大鼠成骨细胞骨细胞因子OPG、RANKLmRNA的基因表达，以探讨中药复方防治骨质疏松症的作用机理。 方法：1.采用胰酶-胶原酶消化法从新生SD小鼠颅骨获取成骨细胞，进行原代、传代培养。取第二代细胞作为实验模型。同时制备各种含药血清。 2.将不同浓度的益骨汤含药血清以及含福善美阳性对照组血清和空白对照组血清与分离培养制得的新生大鼠颅骨第二代成骨细胞共同培养。 3.细胞形态学观察：每日通过相差显微镜观察细胞的形态、生长状况及对照组和中药血清处理组之间的差别。 4.提取成骨细胞总 RNA。（使用Trizol两步法）。 5.mRNA表达的定量：用β-actin作为内参照，RT-PCR测定各组成骨细胞 OPG和RANKL的相对表达量，并计算各组OPG/RANKL的比值。 结果：细胞形态学观察，益骨汤含药血清高中低各组、福善美阳性对照组与生理盐水空白对照组比较，细胞数量较密集，细胞间隙小，形态无明显差异。RT-PCR结果显示：在OPG mRNA的表达方面，高、中、低剂量组、福善美阳性对照组分别与生理盐水空白对照组比较均有显著性差异（P值分别为P<0.01，P<0.05，P<0.05，P<0.01）；高、中、低剂量组与福善美组比较均无显著性差异（P＞0.05）；高、中、低三组组间比较，均有显著性差异（P<0.05）。在RANKL mRNA的表达方面，高、中、低剂量组、福善美组分别与生理盐水组比较均有显著性差异（P值分别为P<0.01，P<0.05，P<0.05，P<0.01）；高、中、低剂量组与福善美组比较均无显著性差异（P＞0.05）；高、中、低三组组间比较，均有显著性差异（P<0.05）。在OPG/RANKL比值改变方面，高、中、低剂量组、福善美组分别与生理盐水组比较均有显著性差异（P值分别为P<0.01，P<0.05，P<0.05，P<0.01）；高、中、低剂量组与福善美组比较均无显著性差异（P＞0.05）；高、中、低三组组间比较，均有显著性差异（P<0.05）。 结论：益骨汤含药血清能上调成骨细胞 OPGmRNA的表达，下调 RANKLmRNA的表达，增加二者的比值，且呈剂量依赖性。由此而知，中药复方益骨汤能直接促进骨形成，间接抑制骨吸收，从而部分揭示了中药复方益骨汤治疗骨质疏松症的细胞学机制之一。