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蜱类是重要的媒介动物,传播多种人、畜疾病,造成极大危害。蜱类的一个重要生物学特点是能够迅速产生大量后代,雄蜱在其中发挥着重要作用。因此,对其研究具有重要的理论和现实意义。 本文以长角血蜱(Haemaphysalis longicornis Neumann)为研究对象,利用电镜技术、Bradford法、SDS-PAGE、局部点滴和体外培养等现代生物学技术对雄性生殖系统结构与蛋白组成、随发育期的动态变化及其影响因素进行了较系统研究,为深入开展蜱类生殖生物学研究提供了依据。主要结果如下: 1.长角血蜱雄性生殖系统由精巢、输精管、射精管和附腺复合物组成。雄性生殖系统的蛋白成分复杂,具有多样性。 2.精巢结构随发育期发生明显变化。饥饿时期精巢小(长960.00μm,宽为163.48μm)。随着吸血的进行,精巢逐渐增大,吸血后两天,长1573.70μm,宽330.44μm;交配期精巢达到最大(长为205852μm,宽490.10μn),几乎占据了蜱体腔的大部分。交配后,精巢变小,萎缩(长为1602.40gm,宽为398.86gm)。 3.精巢蛋白水平在不同发育期呈现明显变化。饥饿期精巢中蛋白水平低(3.50μg/tick);吸血后迅速增加(15.00μg/tick),为饥饿期的4.3倍;交配期蛋白水平明显增加(45.80μg/tick);交配结束后,蛋白水平降低(26.58μg/tick)。 4.附腺蛋白水平在不同发育期呈现明显变化。饥饿期附腺中蛋白水平低(3.50μg/tick)。吸血后两天增加(8.68μg/tick),为饥饿期的2.5倍;进入交配期,蛋白水平达到峰值(31.70μg/tick);交配后,蛋白水平有所降低(22.88μg/tick)。 5.饥饿期精巢中蛋白带少,主带有8条;吸血后两天和交配期明显增加,吸血后两天,增加8条,交配期20条,交配后条带又减少为15条。这几个时期主要条带基本相同,均有分子量为12.9KD、24.9KD、30.3KD、43.3KD、54.1KD、58.3KD、69.4KD和88.5KD的蛋白条带。但从饥饿期到交配期,条带颜色逐渐加深,并且在吸血后两天,增加了分子量为18.0KD、19.7KD、26.3KD、46.5KD、50.0KD、66.5KD、74.5KD和85.4KD的蛋白条带,交配时期,蛋白带为20条,相对吸血后两天,增加了分子量为15.9KD、21.1KD、37.3KD和78.1KD的蛋白带。交配结束后,分子量为15.9KD、21.1 研究论文—中文摘要KD、37.3KD、78.1 KD和85.4 KD处的蛋白含量明显减少,几乎消失。 6.饥饿期附腺的蛋白带少,主带有7条,分子量分别为26.3KD、29.9KD、30.6KD、51·SKD·57.0KD、65.3KD和85.3KD;吸血后两天和交配期明显增加,吸血后两天,增加9条,分子量分别为12.SKD、13.gKD、16.7KD、18.4KD、19.SKD、20.7KD、 35.6KD、sl.SKD和60.9KD;交配期达到21条,增加的蛋白分子量为34.2KD、42.IKD、46.4KD、68.5KD和70.9KD;交配后又增加分子量为74.IKD和77.IKD的两条蛋白带,而分子量为13.gKD、16,7KD、18.4KD、26,3KD和34.2KD蛋白带颜色降低。 7.保幼激素和蜕皮激素均影响长角血蜂精巢和附腺的发育。局部点滴保幼激素类似物法尼醇,在一定浓度范围内能促进附腺的发育。体外培养实验表明,10n留pl和50n留pl的蜕皮激素能够显著促进精巢的发育。 上述结果显示,雄性生殖系统由多个部分组成,精巢和附腺的结构、蛋白质含量和成分随发育的不同阶段发生一系列动态变化;在一定剂量范围内,保幼激素和蜕皮激素均对精子发生和附腺发育有影响。