论文部分内容阅读
Alzheimer’s Disease(AD)是一种多病机异质性疾病,至今尚无临床病因性抗AD药物。随着人口老龄化的迅速发展,AD发病率越来越高,其预防与治疗已成为全球关注的焦点问题之一。传统β-淀粉样蛋白学说(β-Amyloid Cascade Hypothesis)认为Aβ斑块是AD发病的重要原因。但近来研究发现N端谷氨酸被环化形成焦谷氨酸的Aβ变体(pEAβ)具有更强的神经毒性,它的产生是AD特异性病理变化,现研究证实体内pE-Aβ主要由谷氨酰胺酰基环化酶(QC)催化产生,而QC特异性高表达是AD发病早期的关键事件。因此,QC有望成为病因性抗AD药物研究的重要靶标,QC抑制剂亦成为本课题组重点关注的研究领域。本文主要研究内容包括:(1)以Glutamic acid dehydrogenase-QC酶联测试模型和QC检测试剂盒为主要手段,对本实验室设计、合成的LBQI系列小分子化合物进行QC抑制活性评价,结果表明该系列小分子化合物具有显著QC抑制活性,53个化合物中,对QC抑制率达到85%以上的化合物有17个(32%),部分化合物IC50值低于阳性对照,该结果验证了本课题初期的设想。(2)以双转基因小鼠(B6C3-Tg(APPswe,PSEN1dE9)85Dbo/MmJNju)为模式动物,系统研究了高活性QC抑制剂LBQI-35的体内抗AD作用及机理。老年化评分、旷场实验及筑巢实验等行为学研究表明,用药后AD小鼠的空间记忆及探索能力明显提高,AD症状显著改善;免疫组化、Elisa等实验结果证实,LBQI-35可显著抑制AD小鼠脑内QC活性,大大减少脑部pEAβ及老年斑的生成;Ths染色实验结果进一步表明LBQI-35可明显降低脑组织中Aβ和pEAβ聚集沉积物的形成。由上述结果可见,LBQI系列QC抑制剂在体内具有显著抗AD作用,且主要是通过抑制QC活性实现的。本文通过体外活性评价和体内作用研究发现了高效、特异性QC抑制剂类抗AD先导药物,并阐明对抗AD作用与体内抑制QC活性直接相关,为创新性抗AD药物的开发提供了重要研究支持。