中华绒螯蟹是我国传统的水产养殖动物之一,因为其具有良好的风味和较高的营养价值,不仅被人们视为美味佳肴,同时也具有药用价值,因此食用中华绒螯蟹在中国十分流行。稻蟹种养模式是近年来一种被推广使用的高效立体生态化种植方式。然而对于稻蟹模式的研究尚不完善,仍存在诸多亟待解决的问题。在实际生产过程中,水环境中的氨氮浓度的变化会受到多方面因素的影响。中华绒螯蟹的生长安全和食用安全主要取决于其生长的水环境,如果其生长环境中存在环境污染物,污染物可能在其体内积累。而中华绒螯蟹的肝胰腺作为解毒和代谢的关键组织器官,其受环境影响更显著。因此,研究氨氮胁迫对中华绒螯蟹肝胰腺的影响十分必要。本文希望通过测定中华绒螯蟹肝胰腺中参与代谢过程和免疫过程的物质,并依据其变化趋势了解不同氨氮浓度对中华绒螯蟹的影响,为保证甲壳类动物的健康生长和食用安全性提供理论支撑。同时本文也运用蛋白组学的方法研究不同氨氮浓度对中华绒螯蟹肝胰腺的影响。研究结果不仅帮助我们对已测定物质的变化趋势进行了分子水平的验证,也为我们后续深入地、全面地了解氨氮对中华绒螯蟹的影响提供更多研究思路和方向。本文主要通过设置7天室内模拟实验,将60只中华绒螯蟹平均分为三组:对照组(C,0g/L)、低浓度氨氮处理组(LT,0.04g/L)、高浓度氨氮处理组(HT,0.16g/L),分别于第1天、第3天、第5天、第7天取其肝胰腺组织,通过试剂盒法测定蛋白质含量、丙酮酸激酶(PK)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。另外,将中华绒螯蟹置于相同的氨氮浓度水环境中并持续24h,取肝胰腺组织并通过蛋白组学的方法对实验进行验证并进一步深入阐释氨氮胁迫对中华绒螯蟹肝胰腺的影响机制。结论如下:实验结果表明,蛋白质含量与氨氮浓度并未呈现线性关系,而是波动的变化趋势;肝糖原含量则随着氨氮浓度的升高而呈现出降低的趋势,且高氨氮胁迫后,肝糖原积累含量显著减低;丙酮酸激酶活力水平随着氨氮浓度的升高而呈现上升趋势。作为参与清除活性氧的抗氧化物酶之一的过氧化氢酶(CAT)活力随着氨氮浓度的升高而被显著抑制,且均呈现下降趋势。GSH含量和GSH-Px活力均随着氨氮浓度的增加而呈现下降趋势。另外,通过蛋白组学的方法,我们共鉴定出2427个蛋白质,其中C组与LT组之间共有112个差异表达蛋白质,LT组与HT组之间共有324个差异表达蛋白(DEP)(P<0.05)。这些差异表达的蛋白主要参与中华绒螯蟹的免疫过程和生长过程。参与免疫过程的差异表达蛋白包括C型凝集素(CTL)、c-Jun N-末端激酶(JNK)、抗脂多糖因子(ALF)、超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)等。除此之外我们还发现了许多与生长有关的差异蛋白质,如淀粉酶、脂肪酸合成酶、脂肪酸结合蛋白(FABP)、肌动蛋白等。另外通过对比,我们发现LT组和HT两组间有7条KEGG通路发生了显著变化,这些途径与细胞内吞、RNA转运和免疫功能有关。实验结果表明,更高的氨氮浓度会增加中华绒螯蟹的能量代谢,抑制其生长,同时增加免疫系统的负担。除此之外,我们通过蛋白组学的方法不仅得到了相似的结论,更高的氨氮浓度不仅会增加参与先天免疫相关蛋白的表达,也会减少参与抗氧化过程和生产过程相关蛋白的表达,还发现了更多受氨氮浓度影响而出现差异表达的蛋白质,这些发现有利于我们更全面地了解氨氮的胁迫机制。