【摘 要】
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目的:前列腺肿瘤细胞RNA构建DCs疫苗,对其诱导的CTL抗肿瘤免疫效果进行体外评价,以期明确RNA修饰DCs后体外诱导产生前列腺癌细胞的高效、特异性杀伤作用。方法:联合应用GM-CSF,
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目的:前列腺肿瘤细胞RNA构建DCs疫苗,对其诱导的CTL抗肿瘤免疫效果进行体外评价,以期明确RNA修饰DCs后体外诱导产生前列腺癌细胞的高效、特异性杀伤作用。方法:联合应用GM-CSF,IL-4诱导培养小鼠骨髓来源DCs,倒置显微镜和扫描电镜观察其形态,流式细胞术测其表型,MTT法检测DC刺激T细胞功能。Trizol法提取小鼠前列腺癌RM-1细胞总RNA,脂质体转染法将RM-1细胞总RNA转染DC,LDH法测定肿瘤RNA转染的DC诱导特异性CTL对小鼠前列腺癌RM-1细胞杀伤效果,ELISA法检测其IFN-γ分泌水平。结果:小鼠骨髓单核细胞诱导培养6天可获得形态及功能正常的DCs,RNA转染的DC共刺激分子CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达较未转染DC提高(p<0.05),刺激T淋巴细胞增殖能力较未转染DC明显提高(p<0.01),转染前列腺癌细胞RNA的DC诱导CTL对小鼠前列腺癌细胞有杀伤作用,对小鼠肝癌细胞无杀伤作用(p<0.01)。RNA转染的DC较未转染DC诱导的CTL,能产生高水平的IFN-y(p<0.01)。结论:小鼠骨髓来源单个核细胞体外诱导培养可生成大量DCs,小鼠前列腺癌细胞总RNA转染能刺激DC从刺激分子的表达,体外能诱导特异性CTL能特异性杀伤前列腺癌细胞,为我们进一步抗肿前列腺癌疫苗的研究奠定了基础。
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