烟草蚀纹病毒(Tobacco Etch Virus,TEV)属于马铃薯Y病毒属(Potyvirus),最早发现于1930年的美国肯塔基州,随后加拿大的部分烟区也发现了该病毒,逐渐发展成为一种世界性的病毒病。烟草蚀纹病毒主要通过蚜虫的非持久性传播,也可以通过种传和机械传播。烟草蚀纹病毒因病毒株系、寄主种类和长势不同所表现的症状稍有不同。一般来说,植株开始发病初期是小斑点,随着斑点数量的增多,出现线型的坏死组织和斑驳,并沿着叶脉发展,发病严重时病斑布满整个叶片,到发病后期病组织会干枯脱落,只留下焦枯的叶脉。近年来,烟草蚀纹病毒已成为继黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草普通花叶病毒(TMV)、马铃薯Y病毒(PVY)等危害烟叶生产品质的第四大病毒病,在我国各大烟区普遍发生。烟草蚀纹病毒在陕西烟田的发病率一般在10%左右,近年来有逐年上升的趋势。前期本实验室从秦岭植物根际土壤中筛选得到一株对多种病原菌具有显著抗性的解淀粉芽孢杆菌Ba-168。结合前人对芽孢杆菌属的研究,本实验以解淀粉芽孢杆菌Ba-168为出发点,通过过滤离心、硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析等多种蛋白质分离纯化方法对解淀粉芽孢杆菌Ba-168的发酵液进行提纯分离,结合生物活性测定和过敏性坏死反应发现能够诱导烟草系统抗病性的超敏蛋白JDF-d的分子量在25-30 kDa之间。为明确解淀粉芽孢杆菌发酵液中超敏蛋白JDF-d对烟草蚀纹病毒的诱导抗性。本实验以三生烟和普通烟NC89为实验材料,测定100,300,500,800μg/mL的超敏蛋白JDF-d对烟草蚀纹病毒的诱导抗性效果,试验结果表明不同浓度的超敏蛋白JDF-d粗蛋白提取液都能够不同程度的提高烟草对烟草蚀纹病毒的抑制效果,诱抗效果随着超敏蛋白浓度的增加而提高。采用300μg/mL的超敏蛋白JDF-d粗蛋白提取液进行对烟草蚀纹病毒的钝化试验,实验结果表明:超敏蛋白JDF-d对烟草蚀纹病毒的体外钝化效果不明显,说明超敏蛋白JDF-d本身不具备对病毒粒子的抑制效果。随后测定了300μg/mL超敏蛋白JDF-d粗蛋白提取液对烟草的保护作用,结果发现:对烟草喷施300μg/mL超敏蛋白JDF-d粗蛋白提取液24小时和48小时后接种烟草蚀纹病毒的烟叶枯斑数较对照大幅度减少,枯斑抑制率分别达到67.08%和71.33%。在超敏蛋白JDF-d激发子的作用下,烟草叶片的SOD、PAL、POD三种防御酶主要表现为在一定时间内酶活性升高,达到最高点后酶活性开始下降,酶活性均高于对照组。解淀粉芽孢杆菌在自身生长过程中分泌的多种次生代谢产物,这些产物能够对多种病原菌具有显著的抑制作用,并对植物自身起到促生的作用,具有广阔的发展和应用前景。但由于此类物质成分在5%绵羊血琼脂平板上产生溶血现象,限制了解淀粉芽孢杆菌的进一步开发,并对该菌株的安全性带来隐患。用物理和化学诱变方法对解淀粉芽孢杆菌Ba-168进行诱变,通过血琼脂平板对突变菌株筛选出6株溶血性缺失的突变菌株。通过此次试验发现解淀粉芽孢杆菌对紫外诱变更为敏感,致死率更高,诱变结果更为理想,共筛选得到4株理想的突变菌株。将筛选出来的突变型菌株LXY系列通过西瓜炭疽病原菌作为指示菌进行抑菌活性的检测,发现5株突变菌株的溶血环和抑菌圈直径较于原始菌株明显较小。但有一株通过紫外诱变得到的突变菌株LXY-6的抑菌活性没有受到影响,该突变型菌株在溶血活性较弱的同时具有较强的抗菌能力。