论文部分内容阅读
目的:建立人肿瘤组织中热休克蛋白70-肽复合物(HSP70-PC)的分离鉴定方法.方法:用手术切除的人乳腺癌组织为材料来源,制备匀浆,经100,000g超速离心后,取上清除盐,置换缓冲液,依次上样于肝素-琼脂糖凝胶、ADP-琼脂糖凝胶柱进行亲和层析,所得蛋白用7.5﹪与3.4﹪双层不连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染色后经凝胶成像系统分析确定其分子量,再用特异性抗体及碱性磷酸酶标记的二抗做Western Blot进行蛋白质性质与抗原性鉴定.结论:用上述肝素-琼脂糖凝胶、ADP-琼脂糖凝胶序贯蛋白质亲和层析法可分离获得纯度高、并保留肿瘤抗原信息的HSP70.