背景:创伤后应激障碍(Posttraumatic Stress Disorder,PTSD)是指个体目睹或遭受某种重大创伤而引起的一种延迟出现并且持续存在的一种精神障碍,严重影响人们生活。已有多篇文献证实PTSD患者会伴随出现记忆损伤,且在老年时患阿尔兹海默症(Alzheimer’s Disease,AD)的概率提升了两倍以上,显示二者存在密切联系。AD是一种常见的神经退行性疾病,淀粉样斑块(Aβ)沉积形成老年斑(senile plaques,SPs)和由异常过度磷酸化tau蛋白聚集而成的神经纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)是它的两大病理学特征。且AD患者脑内NFTs数量与其临床痴呆程度呈正相关,因此,由过度磷酸化tau蛋白异常聚集形成NFTs被认为是AD关键发病事件。已有研究表明在PTSD患者脑中tau磷酸化水平显著增加,且伴有学习记忆障碍。然而,PTSD过程中tau蛋白异常磷酸化促发AD的分子机制不明。目的:明确PTSD对tau磷酸化影响,阐明PTSD进程中相关激酶参与tau磷酸化修饰的具体机制,为PTSD相关AD的防治提供新分子靶标。方法:通过查阅文献我们选用了一种PTSD经典模型——连续单一刺激模型(SPS)造模(见材料与方法四),造模后七天进行不打扰常规性饲养。七天后通过旷场和高架十字迷宫评估模型是否成功,用酶免疫吸附ELISA试剂盒在记忆关键脑区检测应激相关激素皮质酮的水平。通过Western Blotting、免疫组化检测大鼠海马和皮质tau不同磷酸化位点(AT8(Ser202/Thr205)、p S199、p S396、p S404)变化,同样用ELISA试剂盒检测Aβ的水平。由于tau的过度磷酸化主要是由于上游激酶、酯酶平衡失调引起,本研究应用Western blotting检测tau磷酸化修饰且与应激相关的蛋白磷酸激酶GSK3β、SGK1、AKT、CaMKII以及蛋白磷酸酯酶PP2A的水平。并用q-PCR技术检测应激相关的关键蛋白磷酸激酶SGK1 m RNA水平。为了探究PTSD早期是否出现神经元的丢失与损伤,我们用尼氏染色和WB来检测海马神经元数量和突触相关蛋白(PSD95、synapsin1、synaptophysin)水平。结果:行为学实验结果显示SPS模型鼠产生明显的PTSD样焦虑行为等表征。ELISA结果显示PTSD模型组海马皮质酮水平较对照组有显著增加。海马组织匀浆中,tau的Ser202、Thr205、Ser404位点发生过度磷酸化,但是在Ser199、Ser396位点并无变化。通过ELISA检测在此阶段海马Aβ1-40和Aβ1-42的水平并没有显著性差异。WB实验显示总PP2Ac及其Tyr307位点的磷酸化水平没有变化,提示PP2A活性并无改变。然而,tau上游激酶GSK3βSer9位点的磷酸化(失活型)明显下降,p-Tyr216(激活型)的水平明显上升,揭示GSK3β活性上调。同时发现:GSK3β上游激酶SGK1的总蛋白水平降低,AKT的磷酸化水平下降,其中总SGK1m RNA水平明显减少。并且tau的相关激酶p-ERK1/2的水平显著降低,Ca MKII活性并无变化。尼氏染色表明,海马神经元和对照组相比没有丢失;WB结果也显示突触相关蛋白PSD95、synapsin1、synaptophysin水平没有变化。在皮质中,各项指标无显著差异。结论:在SPS诱导的PTSD进程中,通过应激刺激,激活AKT/GSK3β通路增加tau Ser202/Thr205(AT8)和Ser404位点磷酸化水平;同时因SGK1代偿性消耗增加,导致SGK1/ERK1/2通路下调,部分拮抗tau Ser199、Ser396位点的过度磷酸化。提示:PTSD可能通过同时影响AKT/GSK3β与SGK1/ERK1/2通路,调节tau特异位点的过度磷酸化,参与AD样病理学与行为学异常。