论文部分内容阅读
艾滋病(acquired immunodeficiency syndrom，AIDS)已经成为威胁全人类的重大传染病，自1981年报道首例AIDS至今，HIV在全世界迅速蔓延，累计感染7000余万人，其中1/3感染者已经死亡，所造成的社会负担及危害越来越严重。截止2006年年底，国内HIV感染的人数已超过80万，并且以每年约30％的速度增加，形势十分严峻。最近的疫情评估结果显示，现有HIV感染者中经母婴传播的人数估计约9000例，占总感染人数的1.4％。经过各国研究人员20余年的不懈努力，AIDS研究已取得重大进展。但AIDS发病机制至今还不完全清楚，现有治疗方法不能完全清除HIV。AIDS的发病在于HIV侵袭机体的CD4~+T细胞从而破坏机体的免疫功能，其中某些细胞因子，如白介素、趋化因子等在HIV感染病情进展过程中发挥了重要作用。目前，对HIV感染病情的主要评价指标是CD4~+T细胞数和病毒载量，而细胞因子与HIV感染病情进展的关系以及其评价HIV感染病情的价值还不十分清楚，尤其是儿童HIV感染者/艾滋病患者，由于血样采集难、依从性差等诸多方面的困难，我们对其免疫因子的表达情况知之甚少。儿童AIDS患者的病情特点不同于成人患者，有其特殊之处，表现为免疫功能较低，发病早，病毒载量高，疾病进展快，常伴有营养不良、发育迟缓、代谢异常等，而且机会性感染、卡波西肉瘤等并发症也较成人多见，病程比较复杂。我国正面临着艾滋病大流行的危险，儿童感染和母婴传播是今后防治的重点之一。目前我国艾滋病患者细胞因子方面的资料较少，我国成人与儿童AIDS患者细胞因子水平与正常人相比有何特点，儿童AIDS患者与成人AIDS患者比细胞因子水平有那些不同，这些细胞因子的表达与哪些因素相关等均无详细的资料。因此，就我国AIDS患者的细胞因子进行本底研究，尤其是儿童与成人AIDS患者的各自特点及区别十分必要。1．研究目的本实验选取了部分有重要免疫学意义和临床价值的细胞因子，主要是Th1／Th2免疫因子、趋化因子及MSP等作为研究指标，对我国儿童与成人AIDS患者细胞因子状况进行了初步分析研究，并将儿童AIDS患者与成人患者做比较，为我国艾滋病的防治提供基础资料。2．对象与方法2．1研究对象75例儿童AIDS患者和35例成人AIDS患者作为研究对象，所有病例按照WHO HIV感染分期体系，均属AIDS期(C期)。同样选取学龄前健康体检儿童88人(年龄5～7岁)、健康成人72人(均无特殊病史，体检无异常发现，近2个月无感染史)作为对照(HIV-1未感染者)组。采集每例观察组及对照研究对象抗凝血样一份，置于-80℃备检。2．2血CD4+T细胞计数取全血用CD3、CD4单抗(美国BD公司)荧光标记后进行流式细胞仪(美国BD公司)分析，得出细胞计数。2．3血清HIV-RNA定量RT-PCR检测由北京地坛医院中心实验室完成。2．4血清细胞因子的检测采用ELISA法(试剂盒均为日本MBL公司产品)，操作严格按照说明书进行。分别用全自动酶标仪读取OD值，根据标准曲线求得样品中相应细胞因子的浓度。2．5统计学分析检测结果均以均数±标准差表示，应用SPSS 13.0软件进行One-Way ANOVA和Students t检验，检验水准α=0.05。3．结果3．1儿童AIDS患者所有细胞因子水平均高于儿童健康对照组，(P＜0.01)，成人AIDS患者除了MSP外，其余因子水平也均高于对照组(P＜0.01)，儿童患者细胞因子水平，除SDF-1α和β2-MG差别不明显外，其余高于成人患者(P＜0.01)。3．2小于6岁儿童AIDS患者部分细胞因子(SDF-1α，IL-18，MCP，RANTES，IL-10和sFas)水平高于不低于6岁儿童和成人AIDS患者(P＜0.05)。3．3同一年龄组AIDS患者不同CD4+T细胞分组间细胞因子水平无明显差异(P＞0.05)。3．4儿童AIDS患者IL-18、IL-10、RANTES和β2-MG的表达随着病毒载量的升高而升高(P＜0.05)；IL-10和IL-18的水平在Log(VL)≥5组成人AIDS患者中最高，而趋化因子(RANTES，MCP-1和SDF-1β)的水平在4≤Log(VL)＜5组成人AIDS患者中最高(P＜0.05)；其余细胞因子水平未见明显差异(P＞0.05)。儿童和成人AIDS患者相比较，儿童AIDS患者的细胞因子水平高于成人患者(P＜0.05)。4．结论(1)儿童和成人AIDS患者与儿童和成人正常对照相比，细胞因子表达水平明显升高，免疫系统高度异常激活；(2)儿童AIDS患者细胞因子表达水平高于成人患者，其中小于六岁的儿童患者细胞因子表达水平高于不低于6岁儿童AIDS患者；(3)细胞因子的水平与AIDS患者病毒载量有关，CD4~+T细胞数量对细胞因子水平的影响不大。