论文部分内容阅读
目的探讨外源性PDGF对大鼠脊髓损伤后的神经保护作用及其可能机制,为脊髓损伤的治疗提供新思路、新方法。方法:取SD大鼠90只,雌雄各半,先每4只放一笼内适应性饲养一周。随机分为假损伤组(A组)30只、脊髓损伤生理盐水干预组(B组)30只以及脊髓损伤PDGF干预组(C组)30只,其中假损伤组只打开椎管,不打击脊髓,脊髓损伤组应用Allen’法制作SCI模型。采用改良Gale联合评分法(改良CBS评分法)对每只大鼠分别在术前1天,术后第1天、第7天及第14天四个时相点进行评分,采用双人、双盲的方法,独立观察大鼠双后肢的运动功能并记录。每组分别于移植术后3d、7d、14d三个时相点处死3只大鼠进行灌注、取材、HE染色,行组织学观察;用透射电镜观察神经元的凋亡、坏死情况。每组分别于移植术后1h、6h、24h三个时相点处死3只大鼠进行灌注、取材、行免疫组织化学染色并在光学显微下观察,计数Fos免疫反应阳性神经元(fos-like immunoreactivity neurons,FLIN)。结果:1、在行为学观察中,B组与C组相比,在各时相点差别均有显著性意义(P＜0.05)。2、HE染色:B组在脊髓损伤后3天,灰、白质中出现片状出血,神经元肿胀、破裂、溶解;损伤后7天,损伤坏死区有胶质细胞、内皮细胞、淋巴细胞增生;伤后14天增生更加明显。C组:组织破坏较B组轻,在脊髓损伤后14天,损伤坏死区胶质细胞较较B组明显增加。电镜:B组术后1周神经元变形,胞浆内线粒体明显肿胀,粗面内质网肿胀,神经纤维的髓鞘不完整,板层松解,呈空泡样变,线粒体肿胀,微管、微丝不清楚;2周时上述改变加重。C组术后基本正常,2周时线粒体和内质网轻度肿胀,神经纤维的髓鞘较完整,损害轻,微管、微丝清晰可见,神经元基本正常。SCI后通过透射电镜可以观察到神经元的凋亡与坏死表现;3、在大鼠脊髓损伤后1h和24h时C-fos表达最为显著,6h时明显减少,C组与B组行组间配对比较,在术后各时相点差别均有显著性意义(P＜0.05)。结论:1、PDGF对脊髓损伤后具有神经保护作用。这可能与PDGF参与脊髓损伤的修复及抑制损伤脊髓的炎症反应,促进神经元的存活,对少突胶质细胞具有保护作用,参与控制中枢神经系统少突胶质细胞的数量有关。2、SCI后应用PDGF干预可以抑制c-fos的表达,从而保护神经元并抑制继发性损害,这可能是PDGF保护脊髓作用的分子机制。