【摘 要】
：
目的:探讨胶霉毒素（Gliotoxin,GT）在真菌性角膜炎对小鼠巨噬细胞极化的影响和细胞凋亡作用。方法:1、采用烟曲霉菌B-5233株、同基因GT缺陷株（gli PΔ）和GT重组株（gli PR）感染C57BL/6小鼠的角膜。感染后第1天、第3天和第5天,在裂隙灯下观察各组小鼠角膜感染情况,通过裂隙灯照相、临床炎症评分明确小鼠角膜疾病的严重程度。应用免疫荧光染色来确定各组小鼠角膜中巨噬细胞的浸润
论文部分内容阅读
目的:探讨胶霉毒素（Gliotoxin,GT）在真菌性角膜炎对小鼠巨噬细胞极化的影响和细胞凋亡作用。方法:1、采用烟曲霉菌B-5233株、同基因GT缺陷株（gli PΔ）和GT重组株（gli PR）感染C57BL/6小鼠的角膜。感染后第1天、第3天和第5天,在裂隙灯下观察各组小鼠角膜感染情况,通过裂隙灯照相、临床炎症评分明确小鼠角膜疾病的严重程度。应用免疫荧光染色来确定各组小鼠角膜中巨噬细胞的浸润位置和数量。采用TUNEL技术检测角膜中细胞的凋亡情况。2、采用RT-PCR检测各组小鼠感染角膜中巨噬细胞相关细胞因子（M1型:IL-12、i NOS;M2型:Arg-1、IL-10）、炎症相关因子（TNF-α、IL-1β）以及凋亡相关因子（Caspase-3、Caspase-9）m RNA表达的水平。采用RT-PCR检测GT（125ng/ml）刺激24h的小鼠腹腔巨噬细胞中巨噬细胞相关细胞因子（M1型:IL-12、i NOS;M2型:Arg-1、IL-10）、炎症相关因子（TNF-α、IL-1β）m RNA的表达。3、使用0、62.5ng/ml、125ng/ml、250ng/ml、500ng/ml、1000ng/ml浓度的GT处理的腹膜巨噬细胞和人角膜上皮细胞（HCECs）,利用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）观察细胞活性变化,并通过RT-PCR检测各组caspase-3 m RNA的表达水平。4、采用流式细胞术检测各组小鼠感染角膜CD206+/CD86+巨噬细胞比例的变化,并检测GT（125ng/ml）刺激24h的小鼠腹腔巨噬细胞中CD206+/CD86+巨噬细胞比例的变化,分析GT对感染角膜或腹膜巨噬细胞M1和M2的比例变化的影响。结果:1、与gli PΔ组小鼠角膜相比,感染后第3天,B-5233组和glip R组引起的角膜炎症较轻,临床评分显示,gli PΔ组临床评分明显高于其他两组,P<0.01,差异有统计学意义。gli PΔ组IL-1β和TNF-αm RNA的表达显著高于B-5233组和gli PR组,P<0.01,差异有统计学意义。2、与gli PΔ组小鼠角膜相比,B-5233组和gli PR组在感染后第3天和第5天Caspase-3、Caspase-9 m RNA水平显著升高,P<0.01,差异有统计学意义。Tunel染色显示,B-5233组和gli PR组TUNEL荧光阳性染色主要发生在上皮层,小部分存在基质层和内皮层;gli PΔ组可见较弱TUNEL荧光阳性染色,差异有统计学意义。3、与B-5233组和gli PR组相比,gli PΔ组角膜中巨噬细胞计数在感染后第3天明显较多,P<0.01,差异有统计学意义。4、CCK-8检测显示在GT（250ng/ml）刺激8小时后,巨噬细胞活性显著下降;GT（1000ng/ml）刺激8小时后,HCECs活性显著下降,P<0.01,差异有统计学意义。5、小鼠角膜感染后第3天,与gli PΔ组相比,B-5233组和gli PR组M2型相关细胞因子Arg-1、IL-10 m RNA表达显著升高,M1型相关细胞因子i NOS m RNA表达显著降低,P<0.01,差异有统计学意义。流式细胞术检测发现gli PΔ组小鼠角膜中CD206+/CD86+巨噬细胞比例明显低于其他两组,P<0.01,差异有统计学意义。在小鼠腹腔巨噬细胞体外实验中,经GT（125ng/ml）处理后菌丝共刺激培养24小时,与单纯加菌丝刺激组相比,M1型相关细胞因子i NOS,IL-12 m RNA表达显著下降,而M2型相关细胞因子Arg-1,IL-10表达显著增加,P<0.01,差异有统计学意义。流式细胞术检测发现,与单纯加菌丝刺激组相比,GT和菌丝共同处理显著增加了CD206+/CD86+的比例,P<0.01,差异有统计学意义。结论:在真菌性角膜炎中,GT延长小鼠烟曲霉角膜炎的发病过程。烟曲霉菌通过分泌GT抑制巨噬细胞在角膜中的募集,促进细胞凋亡,并提高巨噬细胞M2/M1分化比例,延缓了烟曲霉角膜炎的起病炎症过程。
其他文献
目的:本论文以国内某制药企业生产的孟鲁司特钠咀嚼片为受试制剂,以默沙东制药有限公司研发的原研药孟鲁司特钠咀嚼片为参比制剂,在空腹和餐后两种状态下的健康受试者中,考察二者的药动学参数及生物利用度,进而评价两种制剂的生物等效性;同时评估受试制剂和参比制剂在健康受试者中的安全性。方法:采用随机、交叉、单剂量、两周期、两序列设计,空腹和餐后试验分别纳入24名健康受试者。按照受试者入组前生成的随机表,每位受
目的:探讨多普勒超声检测子宫动脉相关血流参数以及联合血清妊娠相关蛋白A（Pregnancy-associated plasma protein A,PAPP-A）在妊娠早期预测胎儿宫内生长受限（fetal growth restriction,FGR）的临床价值,以期能对胎儿生长受限进行早期发现、尽早诊断和临床干预。方法:本研究选取2017年1月-2019年12月期间在青岛大学附属医院和临沂市中心
背景与目的:羟考酮缓释片为癌痛治疗中常用的阿片类止痛药物,但一部分人在用药早期可能会出现恶心呕吐,从而降低了患者的依从性,影响癌痛治疗效果。本研究将120名中重度癌痛患者随机分为观察组和对照组,通过观察两组临床资料,分析胃复安片对羟考酮缓释片诱导的恶心呕吐不良反应的预防作用。方法:本文采用前瞻性观察法,观察第一次接受羟考酮缓释片止痛治疗的恶性肿瘤患者。根据数字评分量表评分分为中度疼痛（4-6分）、
房地产项目施工由于受自然环境、社会环境、技术水平等多种不确定性事件的影响而存在各种潜在风险。项目实施过程涉及的流程多,人员复杂多变,风险点较多,一旦风险爆发,不仅仅会对项目本身造成影响,严重地将造成项目的终止,涉事企业也将会有重大损失。风险管理是被实践证明的一种有效的管理方法,通过认真分类、分析、识别和评估施工中的潜在风险,提出针对性的风险控制方法,制定切实可行的风险应对措施,可以大幅度提高施工阶
随着中国经济发展速度越来越快,人们生活水平越来越高,我们可以发现,精神需求是现在大家更加注重的。在建筑业,文化大剧院的建设整体效果引起大家的越发关注。然而,回顾国内外建筑行业,其质量问题也是愈发突出。但是目前文化剧院类项目所采用的质量管理方法较为单一,必定会存在管理上的缺陷,这样就容易造成剧院简称质量效果尤其是剧院内部声学光线设计与安装运行效果不尽如人意,导致群众在剧院体验效果差。质量管理又是贯穿
鉴于我国物流行业的快速发展,其在国民经济的地位和作用日益突出。物流企业在创造经济效益的同时,也更多地承担社会责任,致力于社会公益事业。物流企业公益众筹将众筹与公益相结合,是“互联网+”的新兴社会实践,具备其独特的优势。这类项目的成功在于发起者了解潜在支持者参与项目的动机,从而吸引他们进行资助。然而,现有研究对于物流企业公益众筹项目支持者参与动机缺乏了解;同时,该类项目作为大众参与的价值共创项目,现
目的:主动脉夹层（Aortic dissection,AD）是一种造成心源性猝死（Sudden cardiac death,SCD）的致命性心血管疾病。AD主要组织病理学特征表现为血管重构,即内侧管壁降解,尤其为弹性蛋白和胶原的分解。主动脉壁细胞功能紊乱被认为是AD血管重构的主要原因,如内皮细胞发生凋亡与炎症病理变化。主动脉内皮细胞（Aortic endothelial cells,AECs）在A
研究目的:高尿酸血症（Hyperuricemia）是指嘌呤代谢紊乱,尿酸在体内堆积所导致的慢性代谢疾病,寻找有效的治疗靶点以及治疗方法是当前研究的热点。尿酸盐转运蛋白ABC转运蛋白2（ATP-binding cassette subfamily G member 2,ABCG2）主要表达于肾脏,促进尿酸排泄。本研究通过体外合成ABCG2 mRNA,将其转染至高尿酸血症模型小鼠体内,观察对小鼠尿酸的
目的:基于磁压榨吻合的原理,本研究旨在以新西兰兔为实验动物,研究磁压榨技术是否能够实现胃空肠吻合,以及吻合口的形成是否安全、有效。方法:磁压榨吻合技术（MCA）是近年来新兴的吻合方式,这种吻合借助磁体之间特殊的“非接触性”磁场力,持续作用使夹在其中的组织缓慢缺血坏死,与此同时,吻合口周围的组织能够自浆膜层至黏膜层逐渐愈合,最终形成全新的吻合口。本研究以磁压榨吻合的原理为基础,首先随机选取健康的新西
目的:本研究通过建立动物模型,观察尿酸性肾病中肠道菌群组成的变化,并基于“肠-肾轴”理论,探讨姜黄素在尿酸性肾病中对肠道菌群的影响及其保护肾功能的作用机制。方法:将30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。采用腺嘌呤（150mg/kg/d）联合氧嗪酸钾（250mg/kg/d）灌胃制备大鼠尿酸性肾病模型,连续造模4周。造模成功后,治疗组给予姜黄素（200mg/kg/d）灌