目的:前交叉韧带（anterior cruciate ligament,ACL）断裂属运动医学常见疾病,近期会导致关节不稳定、活动受限,进而运动水平下降,远期膝关节退行性病变进程加快,大多数患者需手术治疗。曾以膝关节切开ACL修复为主要治疗方式,后因中远期随访结果不佳应用逐渐减少,随后ACL重建成为治疗金标准。经过数十年的发展与改进,目前ACL重建手术技术已日益成熟,但术后患者膝关节功能恢复情况主观及客观评价仍有较高的不满意率,同时术后综合再手术率及二次损伤率居高不下。普遍认为与传统ACL重建治疗术后膝关节本体感觉功能缺失所导致的运动稳定性差相关,因此ACL修复近年来重新受到关注。ACL修复较ACL重建具有先天的优势,主要包括以下几个方面:1.无供腱区损伤、疾病传播风险或排异反应问题;2.保留韧带原有本体感受器;3.无需肌腱移植物体内再韧带化过程;4.更符合原有ACL解剖走行。上世纪末期陆续有研究指出ACL修复疗效不佳与适应症选择不当、关节切开并发症等因素相关。至目前,关节镜下ACL修复用于治疗急性ACL近股骨端断裂已取得满意的近中期疗效。但相关研究也只是集中在国外极少数几个运动医学中心,存在以下问题:1.技术方法不统一;2.多数方法技术要求高,难以推广;3.部分技术手术操作时间长,费用高。临床需要一种操作简单,易于掌握,疗效稳定的修复技术。因此,本研究旨在介绍一种创伤更小,手术时间更短,不产生附加损伤的一期修复方法,并评价其临床疗效。组织工程生物疗法也在ACL损伤中广泛应用,富血小板血浆（platelet rich plasma,PRP）作为一种血液制品,富含多种生长因子,已有研究用于促进ACL断裂后愈合。但目前尚未见关节内注射PRP用于ACL断裂一期修复后治疗的相关研究报道。因此我们将在基于动物实验的组织机制研究中探索关节内应用PRP对ACL一期修复后韧带愈合的作用及其对本体感受器和膝关节OA的影响。此外,一期修复本身对断裂韧带的组织学影响尚未见相关报道,动物实验中将同时进行相关在体研究。研究方法:1.采用前瞻性对照实验,将急性ACL断裂患者分成两组。重建组行自体肌腱单束解剖重建ACL;修复组采用ACL一期修复治疗:非可吸收缝线贯穿缝合ACL远端残余组织,随后应用pushlock锚钉将ACL断端固定于股骨止点处。患者纳入标准:ACL股骨端断裂且韧带残端组织结构良好;骨骺闭合,且年龄小于50岁;损伤至手术时间少于3周;单侧膝关节损伤。每个患者术前和术后3个、6个月、12个月分别进行主观和客观功能评价,包括IKDC主观评分、lysholm评分、Kneelax3测量、轴移试验和Lachman试验、被动活动察觉阈值（TTDPM）、被动角度再生试验（JPR）,从而评价两组患者的疗效差别。2.实验兔48只随机分成4组,空白对照组:不做任何处理;对照组:仅切断ACL;修复组:切断ACL后行一期修复;修复+PRP组:切断ACL后行一期修复,术后联合应用PRP。术后4周开始对照组和修复组给予膝关节内0.3 ml 0.9%生理盐水注射,每周1次,连续3次;修复+PRP组膝关节内注射自体PRP 0.3 ml,每周一次,共3次。术后8周、12周分别处死实验兔,观察韧带大体愈合情况并取股骨-韧带-胫骨复合体进行后续试验。3.HE染色分析各组动物ACL及股骨端腱骨愈合部位镜下组织形态及细胞情况;根据HE染色和甲苯胺蓝染色采用Mankin评分评价各组膝关节软骨情况。4.免疫组化检测各组ACL体部CD34、S100,腱骨愈合部位COLⅠ,关节软骨COLⅡ表达情况。PCR检测各组腱骨愈合部位COLⅠ、CD34,关节软骨COLⅡm RNA表达情况。WB检测各组腱骨愈合部位COLⅠ,关节软骨COLⅡ含量。结果:1.最终获取38名ACL断裂患者资料,每组各19例。术后各个时间点,两组患者Lysholm评分、IKDC主观评分比较无显著差异。术后不同时间点kneelax3测量结果双侧膝关节差值两组比较差异无统计学意义。不同随访时期两组间Lachman试验、轴移试验阳性率比较未见明显差异。术后3、6个月时两组患者膝关节TTDPM和JPR值对比差异显著,修复组优于重建组;术后12个月时两组患者膝关节TTDPM和JPR值对比差异无统计学意义。2.动物术后8周的ACL组织切片HE染色在对照组可见组织崩解,胶原纤维吸收散乱,细胞皱缩,核异形;修复组韧带织保存可,细胞数量接近空白对照组且形态可;修复+PRP组胶原组织明显致密,排列规整,细胞数较多且饱满。术后12周时,对照组多数动物韧带残端已完全吸收;修复组镜下可见胶原组织再生,排列渐整齐,细胞数量较术后8周时增加;修复+PRP组表现近似于正常ACL。3.空白对照组腱骨愈合部位可见细胞密度高,组织结构致密潮线宽泛不均。修复组术后8周腱骨愈合部位可见韧带与骨质的结合,组织分界明显;术后12周时,腱骨愈合部位韧带与骨质的融合更趋紧密,潮线渐宽泛,可见组织互相渗透。修复+PRP组术后8周时腱骨愈合部位潮线较单纯修复组略宽泛,腱骨愈合处韧带组织更为致密;至术后12周时腱骨愈合部位韧带与骨质的融合状态接近正常。4.术后12周空白对照组软骨光滑平整,软骨层厚且均匀,软骨细胞分布均一散在。对照组可见软骨局部破坏,软骨细胞数量明显减少,陷窝空虚,软骨基质着色浅,细胞有簇集现象。修复组整体情况明显好于对照组,但局部仍可见软骨表面欠光滑,软骨细胞密度较空白对照组低。而修复+PRP组软骨表面及软骨细胞情况接近空白对照组。各组膝关节Mankin评分显示对照组术后已经出现早期OA表现,修复组评分较对照组评分明显下降;修复+PRP组未见明显OA表现。5.血管密度值（Microvessel density,MVD）结果显示术后8周对照组较空白对照组和修复组MVD值明显减少;修复组与空白对照组间无明显差异。术后8周和12周时,修复+PRP组相比于修复组MVD值均增加。修复组与修复+PRP组术后12周时MVD值明显高于术后8周时。6.本体感受器方面,术后8周时,其余三组相比于空白对照组本体感受器数量均下降;修复组相比于对照组本体感受器数量明显增高;修复+PRP组相比于修复组本体感受器数量也明显增加。术后12周时,修复+PRP组和修复组相比于空白对照组本体感受器数量仍减少;修复+PRP组和修复组相比本体感受器数量仍增多。术后12周相比术后8周,修复+PRP组和修复组本体感受器数量均明显增加。7.术后各时间点腱骨愈合部位COLⅠ、CD34表达情况修复+PRP组相比于修复组增加,修复组和修复+PRP组相比于空白对照组COLⅠ表达均减少;术后修复组和修复+PRP组CD34表达逐渐增加,至术后12周时两组CD34表达明显高于空白对照组。术后12周对照组相比于空白对照组软骨组织细胞COLⅡ阳性表达量显著减少;修复组软骨组织细胞COLⅡ表达量较对照组明显增多,同时较空白对照组减少;而修复+PRP组COLⅡ表达量与空白对照组接近。结论:1.临床研究证实在合理选择适应症的前提下,ACL一期修复相比于韧带重建手术在术后早期同样可以获得良好的关节稳定性,并且术后早期膝关节本体感觉功能优于传统的ACL重建术。二组术后并发症发生率及再手术率无差别。临床上ACL一期修复可以作为部分患者相比于重建更好的治疗选择。2.一期修复后的ACL可以得到保留,包括其原有的血管和本体感受器,并能够发生愈合。关节内注射PRP可以促进ACL的愈合,促进韧带内血管结构和本体感受器的存活再生,并可以降低膝关节OA严重程度。