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微生物油脂是一种新兴的油脂资源,它除了应用于食品医药行业,也可为制备生物柴油提供廉价而广泛的原料。随着现代生物技术的发展,对野生菌株进行诱变并针对菌株寻求最优发酵条件可获得更高产的产油菌株,从而提高产油微生物的应用效率。本实验先从土壤中筛选分离产油真菌,得到一株酵母T2-6,通过形态学和生理生化方法鉴定其为胶黏红酵母(Rhodotorula glutinis)。以T2-6为出发菌株进行诱变,经几种诱变方法的比较,最后确定以硫酸二乙酯和紫外线复合诱变效果最好。采用苏丹黑B染色和抗Cerulenin相结合的筛选方法,并用摇瓶发酵复筛方法获得一株生产能力比出发菌株显著提高的突变株T2-6-2-4。本实验进一步对T2-6-2-4的摇瓶发酵条件进行研究,发现在培养基中加葡萄糖100g/L,酵母膏3g/L,硫酸铵1.5 g/L,硝酸钾0.5 g/L及各种微量元素,初始pH5.5,28℃,180 r/min的条件下发酵144 h后,油脂产量、油脂含量分别达到14.79 g/L,72.89%,比原始菌株分别提高了146.91%,145.17%。进而本实验研究了T2-6-2-4在发酵罐中分批发酵和补料分批发酵的工艺。分批发酵条件下T2-6-2-4的生物量和油脂产量分别为30.42 g/L和19.08 g/L。在维持pH值、溶氧条件下,补加碳源,T2-6-2-4的生物量和油脂产量分别达到,33.96g/L和21.07 g/L。气相色谱分析显示油脂脂肪酸组成,棕榈酸20.8%,油酸56.9%,亚油酸10.7%,硬脂酸5.9%,亚麻酸2.2%。与植物脂肪酸成分相似,可以作为生产生物柴油的原料。