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月季是世界三大切花花卉之一,我国是世界上月季切花栽培面积和产量的大国,月季作为绿化苗木的应用也较广泛。然而受非生物逆境胁迫,如干旱、盐碱、低温和高温等问题影响,月季的产量和推广受到一定的限制。我们迫切需要选育新的月季品种满足市场和消费者的需求。但经过长期的杂交选育,许多现代月季品种已失去了浓郁的香味,综合抗逆性大大降。20世纪90年代发展起来的转基因技术在其它作物的应用成功,无疑为月季育种提供了一条新途径。而建立再生体系和遗传转化体系是对植物进行转基因操作的重要前提条件,长期以来月季的低转化率一直是制约其基因功能研究的主要障碍。我们以‘月月红’月季为试验材料,通过改良光照和培养基,大大的提高了月季的体胚发生和再生转化率:构建MtDREB1C和RcXET基因聚合表达载体并遗传转化月季,大大的提高了转基因植株的耐逆性,并克服了由于抗逆基因表达导致植株矮小的问题。主要的研究结果如下:1)优化了‘月月红’月季幼茎腋芽微繁体系,采用幼叶、幼茎诱导愈伤,发现了适宜月季幼叶愈伤诱导培养基为SH+3%糖+2,4-D3.0 mg.L-1+TDZO.5 mg·L-1,且在暗中诱导,单独使用2,4-D2.0 mg·L-1,2,4-D 3.0 mg·L-1可以100%得到愈伤组织,幼茎适合诱导愈伤组织的培养基为SH+2,4-D 3.0 mg·L-1,诱导率达到83.21%筛选出‘月月红’月季愈伤组织分化不定芽最佳培养基。叶片愈伤组织分化培养基为MS+TDZ1.0 mg·L-1+6-BA1.0 mg·L-1愈伤组织可以直接分化出不定芽,分化率达到5.0%;2)研究了光和植物生长调节剂对‘月月红’月季体细胞胚发生的影响,红光条件下诱导培育下产生了大量的带有膨大子叶的双子叶型体胚和单子叶型体胚,黑暗条件下则诱导出大量的无子叶的体胚;2.5mg.L-1浓度ABA培养基对于双子叶型体细胞胚增殖和萌发的提高是最有效的,随着ABA(从0-5.0 mg·L-1)的浓度的升高,异常的多子叶体细胞胚产生比例也在升高;双子叶型体细胞胚获得的再生植株的比例最高,达到了41.8%;TDZ、2,4-D在月季体胚诱导中起到决定性的作用,红光对体胚子叶形态的形成有积极作用,ABA对体胚子叶的数目有影响;3)设计合适的引物,采用长引物PCR法快速构建基因聚合表达载体,构建了MtDREBlC和RcXET基因聚合表达载体,将两个基因聚合构建到同一表达载体中,它是一种不依赖酶切连接的基因剪切和连接方法,大大提高了基因聚合的转化效率和连接效率。4)同时将聚合基因通过农杆菌介导法转化到植株上胚性愈伤组织再分化成苗;获得了10株抗性月季再生植株,经PCR检测,Southern检测5株为阳性转化植株,其中2株是多拷贝。MtDREB1C和RcXET基因聚合表达能同时增强转基因月季的耐非生物逆境能力和生长势,可以克服因为MtDREB1C基因过量表达而导致植株矮小的问题。