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目的:研究甘露聚糖肽联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人肝癌HepG2细胞株增殖及凋亡的影响,并通过观察各组细胞Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达情况,探讨其诱导HepG2细胞凋亡可能的作用机制。方法:将人肝癌HepG2细胞分成对照组、5-Fu组、甘露聚糖肽组及联合用药组。利用倒置相差显微镜观察各组细胞的形态学变化,MTT法观察药物对各组细胞增殖的影响,流式细胞仪检测各组细胞的周期时相变化、增殖指数(PI)及凋亡率,细胞免疫化学法分析各组细胞Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达情况。结果:(1)倒置相差显微镜下观察甘露聚糖肽作用于HepG2细胞后,细胞呈现不同程度的变圆、缩小,细胞贴壁疏松。其与5-Fu合用后,镜下可见细胞体积缩小,核固缩浓染,细胞染色质浓缩,聚集于核边缘形成块状或新月状,细胞膜出泡、凋亡小体形成。(2)MTT法检测结果显示甘露聚糖肽单独应用后对HepG2细胞的增殖抑制作用较弱,与5-Fu联合使用后能明显增强对细胞生长的抑制作用,并呈时间和剂量依赖性。(3)流式细胞仪检测结果表明,药物作用HepG2细胞48小时后,与对照组及5-Fu、甘露聚糖肽组相比,两药联合组G0/G1期细胞比率明显增加,S期细胞比例明显减少,细胞增殖指数(PI)下降,细胞增殖受阻于G1/S期。AV/PI染色后流式细胞仪检测显示药物作用HepG2细胞48小时后,两药联合组细胞凋亡率为33.92±2.26%,与对照组及5-Fu、甘露聚糖肽组相比,凋亡率明显增高(P<0.01)。(4)细胞免疫化学法分析显示,药物作用于HepG2细胞48小时后,与对照组相比,5-Fu组细胞的Bcl-2蛋白表达率降低,Caspase-3蛋白表达率增加(P<0.01),甘露聚糖肽组细胞Bcl-2蛋白表达降低、Caspase-3蛋白表达未见明显变化。两药联合使用后,与对照组及5-Fu组相比,Bcl-2蛋白表达率明显降低,Caspase-3蛋白表达率明显增加(P<0.01)。结论:(1)5-Fu能抑制HepG2细胞的增殖,在与不同浓度的甘露聚糖肽联合应用后,这种抑制细胞增殖的作用增强,并呈时间和剂量依赖性。(2)5-Fu联合甘露聚糖肽后,可显著的抑制HepG2细胞的生长,并诱导其凋亡,使细胞生长周期阻滞于G1/S期。(3)Bcl-2和Caspase-3蛋白可能在5-Fu联合甘露聚糖肽抑制HepG2细胞的增殖及诱导其凋亡的过程中发挥重要的调控作用。