论文部分内容阅读
目的：腹腔注射蝮蛇毒素建立急性肺损伤模型，观察增加或减少H2S的含量对氧化保护及氧化损伤指标的影响，探讨H2S/CSE体系对蝮蛇毒素致大鼠急性肺损伤氧化应激的调节作用。方法：1.分组：采用完全随机设计将36只雄性清洁级SD大鼠分成6组，每组6只，分别为：①生理盐水对照组（N组）；②蝮蛇毒素组（S组）；③蝮蛇毒素＋低剂量NaHS组（S+L组）；④蝮蛇毒素＋中剂量NaHS组（S+M组）；⑤蝮蛇毒素＋高剂量NaHS组（S+H组）；⑥蝮蛇毒素＋PPG组（S+PPG组）。2.方法：①将N组腹腔注射等容积生理盐水，其余组分别腹腔注射蝮蛇毒素。②3h后，N组和S组分别腹腔注射等容积生理盐水；S+L, S+M, S+H组和S+PPG组，分别腹腔注射0.78mg/kg,1.56mg/kg和3.12mg/kg剂量的NaHS和30mg/kg剂量的PPG。③6h后，将各组实验动物处死，采集心脏血并分离留取血清，取相应肺组织留作标本。④肺组织HE染色光镜观察病理学变化并行病理学评分，测定肺组织湿/干重比，去蛋白法检测血浆H2S含量，亚甲基蓝法测定肺组织CSE活性，WST-1法测定肺组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）活力，酶促反应谷胱甘肽消耗法测定肺组织谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）活力，酶联免疫法（ELISA）法测定肺组织8-异构前列腺素（8-iso-PGF2α）含量。结果：1.肺组织湿/干重比（W/D）变化：与N组相比较，S组W/D值升高（P<0.01）。与S组相比较，不认为S+L组W/D值下降存在差异（P>0.05）；S+M, S+H组W/D值均有明显下降（P<0.01）；S+PPG组W/D值升高（P<0.05）。2.光镜下肺组织病理学变化及肺损伤病理评分（IQA）：与N组正常肺组织相比，S组肺泡结构明显紊乱、破坏，肺泡结构不完整，明显肺泡水肿，大量透明膜形成，肺间质明显增厚，肺间质及肺泡大量红细胞及粒细胞浸润，可见肺不张，IQA显著升高（P<0.01）。与S组相比较，S+L组肺组织损伤未见明显改善（P>0.05），S+M,S+H组上述肺损伤情况有所减轻，肺泡结构基本完整，但仍见肺泡间隔增厚，炎细胞浸润，肺泡腔内有少量红细胞漏出，偶见透明膜，IQA明显下降（P<0.01）；S+PPG组肺损伤明显加重，肺泡塌陷及肺不张明显，多量肺泡见广泛透明膜形成，IQA升高（P<0.05）。3.血浆H2S含量及肺组织CSE活性变化：与N组比较，S组血浆H2S含量和肺组织CSE活性明显降低（P＜0.01）。与S组比较，S+L组血浆H2S含量和肺组织CSE活性未见明显变化（P＞0.05），S+M, S+H组血浆H2S含量和肺组织CSE活性均显著升高（P＜0.01）；S+PPG组血浆H2S含量及肺组织CSE活性降低（P＜0.01或P＜0.05）。4.肺组织匀浆SOD及GSH-Px活力变化：与N组相比较，S组肺组织匀浆SOD及GSH-Px活力明显下降（P<0.01）。与S组相比较，不认为S+L组肺组织匀浆SOD及GSH-Px活力升高存在差异（P>0.05），S+M, S+H组肺组织匀浆SOD及GSH-Px活力均有明显上升（P<0.01）；S+PPG组肺组织匀浆SOD及GSH-Px活力减低（P<0.05或P＜0.05）。5.肺组织匀浆8-异构前列腺素（8-iso-PGF2α）含量的变化：与N组相比较，S组肺组织8-iso-PGF2α含量明显升高（P<0.01）。与S组相比较，不认为S+L组肺组织8-iso-PGF2α含量下降存在差异（P>0.05），S+M, S+H组肺组织8-iso-PGF2α含量均有明显下降（P<0.01）；S+PPG组肺组织8-iso-PGF2α含量升高（P<0.01）。结论：1.外源性补充H2S，蝮蛇毒染毒大鼠SOD与GSH-Px水平上升，8-isoPGF2a水平下降，肺损伤减轻；而抑制H2S生成，蝮蛇毒染毒大鼠SOD与GSH-Px水平下降，8-isoPGF2a水平上升，肺损伤加重。2. H2S可能通过改善氧化/抗氧化系统之间的失衡状态，减轻蝮蛇毒染毒后大鼠急性肺损伤的程度。