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目的：肾病综合征(Nephrotic syndrome, NS)是临床上常见多发的疾病,西医治疗难度大,而中医治疗取得了显著成果,故从新的理论总结开始,开展了本课题研究。本课题分为理论探讨和实验研究两大部分,以邱幸凡教授提出的“脏虚络痹”病机理论为基础,拟定了温阳利湿通络方,运用现代医学研究方法,深入研究了该方对阿霉素诱导的肾病综合征大鼠模型的治疗作用及其部分机制,目的在于为临床NS的治疗提供新的理论和实验依据。理论探讨：1、基于络脉络病理论及“脏虚络痹”的病机理论,提出“肾脾阳虚,湿瘀阻络”是NS的基本病机：(1)肾脾阳虚是致病之本：肾脾阳虚是NS的基本病机；(2)湿瘀阻络为致病之标：湿瘀阻络是NS发生的病理关键；(3)脏虚络痹相互影响,互为因果。2、根据病机,提出“温肾补脾,利湿泄浊,化瘀通络”是NS的基本治疗法则：(1)补脏以治其本：以补脾肾之阳为基本；(2)通络以治其标：“利湿泄浊,化瘀通络”是治疗NS的关键；3、提出治疗NS的方药为“温阳利湿通络方”。该方由熟附片10g、黄芪30g、党参10g、白术10g、泽泻10g、车前子15g、水蛭6g和蝉蜕10g组成。方法：本研究采用尾静脉一次性注射阿霉素6mg/kg的方法建立阿霉素诱导的肾病综合征大鼠模型,即按Bertani法造模,进行了温阳利湿通络方干预该模型的实验研究。将40只Wistar雄性大鼠,随机分为正常组(n=10)、模型组(n=10)、中药组(n=10)、西药组(n=10)。造模成功后,正常组和模型组灌生理盐水(1ml/100g体重)；中药组灌温阳利湿通络方(1ml/100g体重)；西药组灌盐酸贝那普利溶液(0.3mg/100g体重),均每日一次,连续灌胃四周。给药期间每天观察食量、体毛、大便、精神状态、体重及水肿情况。尿标本检测24小时尿蛋白定量(24HUPQ)、β2微球蛋白(β2-MG)、尿白蛋白(ALB),采用干化学法检测；血标本检测血肌酐(Scr)、尿素氮(Bun)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)和胆固醇(CHOL),采用全自动生化分析仪测定。ET-1、VEGF及TGF-β1的变化采用免疫组化法研究。TGF-β1mRNA的表达采用RT-PCR方法检测。结果：1、对大鼠一般情况的观察：正常组大鼠活动灵活,反应较快,皮毛致密、有光泽,没有出现水肿；模型组大鼠造模后3天出现活动减低,精神差、体毛翻转凌乱、大便稀,食量减少,3周后出现水肿并逐渐加重,尤以腹水明显；中药组与西药组大鼠经治疗后,精神较模型组好,食量好,大便呈颗粒状,活动情况好转,且水肿较轻。模型组、中药组、西药组在造模成功时,体重较正常组显著下降(P<0.01)；实验结束时,中药组和西药组大鼠体重显著高于模型组(P<0.05),而中药组与西药组之间无显著性差异；2、对大鼠蛋白尿的影响：模型组、中药组、西药组于造模后第7天开始,24HUPQ均明显高于正常组(P<0.01),说明造模成功。治疗后第14、21、28天,中药组的24HUPQ明显低于模型组(P<0.01),中药组与西药组比较无显著性差异。实验结束时,中药组的尿β2-MG明显低于模型组(P<0.01),尿ALB低于模型组(P<0.05)。中药组与西药组比较无显著性差异；3、对大鼠血脂的影响：实验结束时,模型组大鼠TG、CHOL结果明显高于正常组(P<0.01),中药组和西药组的TG结果低于模型组(P<0.01),中药组与西药组比较无显著性差异；中药组和西药组的CHOL结果低于模型组(P<0.05)。中药组与西药组比较无显著差异；4、对大鼠肾功能的影响：实验结束时,模型组、中药组、西药组与正常组比较,血Sci、BUN的结果均无显著性差异；5、对大鼠血清蛋白的影响：实验结束时,模型组、中药组、西药组大鼠的TP、ALB结果均明显低于正常组(P<0.01),中药组和西药组大鼠的TP、ALB结果高于模型组(P<0.05),而中药组与西药组之间无显著性差异;6、对大鼠ET-1、VEGF、TGF-β1及TGF-β1mRNA水平的影响:模型组与中药组的ET-1、VEGF、TGF-β1及TGF-β1mRNA水平均明显升高(与正常组相比,P<0.01),但中药组的ET-1、VEGF、TGF-β1及TGF-β1mRNA水平较模型组显著降低(P<0.05),中药组与西药组无显著性差异；7、病理学观察：在光镜下,模型组大鼠HE及PAS染色病理切片有轻度系膜增生,其它各组肾小球及肾小管均未见明显病理变化。在电镜下,正常组大鼠肾小球基底膜未见增厚,系膜未见增生,足突清晰完整,未见融合。模型组大鼠肾小球基底膜未见增厚,局部系膜细胞、基质增生,足突间隙消失,足突广泛融合,尚可见部分内皮细胞异染色质染色加深、成块、趋边,核孔增宽,出现细胞凋亡；模型组大鼠可见部分肾小管细胞周边水肿,溶酶体增多。中药组和西药组,肾小球病变程度相似,基底膜平滑,未见增厚,系膜未见增生,足突部分融合,肾小管细胞结构正常,与模型；组比较,病变程度明显较轻。结论：本研究结果提示：温阳利湿通络方能显著改善阿霉素诱导的肾病综合征大鼠的一般营养状况；提高阿霉素诱导的肾病综合征大鼠血清白蛋白、总蛋白水平,降低大鼠蛋白尿、甘油三酯、胆固醇水平。该方对阿霉素诱导的肾病综合征大鼠肾组织的超微结构有改善作用。其治疗机制可能与下调ET-1、VEGF、TGF-β1及-TGF-β1mRNA水平有关,在降低ET-1、VEGF、TGF-β1及TGF-β1mRNA水平的过程中,减少了中性粒细胞和单核巨噬细胞浸润,抑制炎症细胞的聚集活化和炎症介质的释放,从而减轻足突细胞损伤,减少足突融合,达到保护肾小球滤过膜的结构和功能的作用,,最终降低尿蛋白,并且,因其减轻了肾脏免疫损伤,从而能调节蛋白和脂质代谢,抑制脂质过氧化物的形成,达到升高血清白蛋白,降低血脂的作用,因此,对ET-1、VEGF、TGF-β1及TGF-β1mRNA的研究,从细胞免疫及分子角度更深入阐明了温阳利湿通络方对NS治疗作用的分子机制。提示：温阳利湿通络法及其方是中医治疗肾病综合征的一种优势方法。