论文部分内容阅读
目的本实验采用TUNEL法、化学检验法等技术观察缺血后处理对大鼠大脑缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡的影响,并检测脑组织匀浆中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,探讨缺血后处理脑保护机制及其可能的临床应用价值,为在临床中应用提供理论支持。方法健康雄性SD大鼠,质量250—300g,10%水合氯醛0.3ml/100mg腹腔注射麻醉,随机分为五组:①假手术组(sham组,n=8),只进行麻醉和分离解剖左右两侧颈总动脉,不做其它处理。②缺血再灌注1组:给予脑缺血30分钟,再灌注24小时(I/R1组,n=8)。③缺血再灌注2组:给予脑缺血30分钟,再灌注48小时(I/R2组,n=8)④缺血后处理1组:给予脑缺血30分钟,缺血后处理后再灌注24小时(Postl组,n=8)。⑤缺血后处理2组:给予脑缺血30分钟,缺血后处理后再灌注48小时(Post2组,n=8)。使用无创动脉夹夹闭双侧颈总动脉实现脑缺血,撤除动脉夹实现再灌注。在再灌注即刻给予大鼠双侧颈总动脉15s再灌注/15s阻断3个循环处理实现缺血后处理。实验结束,颈动脉放血处死大鼠,快速开颅取脑组织,将左侧半球置于10%甲醛溶液固定制作石蜡切片,采用TUNEL法观察大脑顶叶皮质细胞凋亡情况;用右侧半球顶叶皮质制作脑组织匀浆检测MDA含量与SOD活性。结果丙二醛和超氧化物歧化酶检测结果:与sham组相比,I/R1组、I/R2组、Postl组、Post2组MDA含量增高,差别有统计学意义(P＜0.05);与sham组相比,I/R1组、I/R2组、Post1组、Post2组SOD活性降低,差别有统计学意义(P＜0.05):与I/R1组相比,Post1组MDA含量降低,SOD活性升高,差别有统计学意义(P＜0.05);与I/R2组相比,Post2组MDA含量降低,SOD活性升高,差别有统计学意义(P＜0.05);与I/R1组相比,I/R2组MDA含量降低,SOD活性升高,差别有统计学意义(P＜0.05);与Post1组相比,Post2组MDA含量降低,SOD活性升高,差别有统计学意义(P＜0.05)。细胞凋亡检测结果:sham组可见少量凋亡细胞。与sham组相比,I/R1组、I/R2组、Post1组、Post2组凋亡指数升高(P＜0.05)。与I/R1组比较,Post1组凋亡指数降低(P＜0.05);与I/R2组比较,Post2组凋亡指数降低(P＜0.05)。与I/R1组相比,I/R2组凋亡指数降低(P＜0.05);与Post1组相比,Post2组凋亡指数降低(P＜0.05)。结论①大鼠脑缺血再灌注损伤可以引起细胞凋亡;②缺血后处理对脑缺血再灌注损伤诱发的细胞凋亡有抑制作用;③缺血后处理可以抑制脑缺血再灌注引起的脂质过氧化反应。