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目的:噬菌体文库常常用来确定与特定分子结合的短肽,而噬菌体展示技术作为一种日益重要的技术在体内研究中已得到广泛应用。我们在利用噬菌体PHD-C7C文库进行鼻腔给药以寻找可通过血脑屏障的短肽时,发现了噬菌体在体内的失活现象。之后,我们对这一现象进行了更为细致的定量研究,并初步探讨了血液中影响噬菌体活性的因素及其作用机理,为噬菌体在体内作为治疗或诊断的可能应用以及动物体内噬菌体展示技术的进一步完善提供理论基础。
方法:检测了不同时间梯度时M13噬菌体在血清和全血中的残余活性,进行了体内实验,然后比较了几种情况下噬菌体在血液中的失活现象(注射免疫抑制剂与否、KSCN洗脱与否、免疫缺陷型小鼠、体温或补体失活的高温),并初步探讨了噬菌体失活问题的解决办法。
结果:血清造成噬菌体快速失活,KSCN及环磷酰胺处理可部分逆转该效应,60℃处理基本上完全消除该失活现象。T细胞缺陷型裸鼠和普通小鼠的失活效应相似。胰蛋白胨和牛血清白蛋白可部分解除血清对噬菌体的失活作用。
结论:血清中存在的因子是导致噬菌体失活的主要因素,且很可能是由IgM介导的补体引发。