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沙门氏菌(Salmonella)—直是我国种鸡场重点防控和净化的病原菌之一。随着抗生素残留、耐药菌增多等问题的不断出现,尤其是多重耐药(multidrug resistance,MDR)Salmonella 的增多,加大了禽沙门氏菌病(salmonellosis)的防控难度。因此,一种绿色高效的新型饲料添加剂酵母提取物(selected yeast fraction,SYF)作为抗生素的替代物在家禽生产中有着广阔的应用前景。本课题研究的目的是为了解广西各区种鸡场各生产环节Salmonella的污染现状,掌握Salmonella分离株的优势血清型及耐药情况,为salmonellosis的净化与防控提供科学依据;同时,通过实验室攻毒保护试验和田间应用试验,研究SYF对广西鸡源Salmonella优势血清型鸡白痢沙门氏菌(S.pullorum,SP)和鸡伤寒沙门氏菌(S.gallinarum,SG)的防控效果,并与有机酸产品进行比较,为Salmonella的净化与防控提供新的方法。课题于2018年分别从南宁、玉林、柳州的4家种鸡公司采集不同生产环节的样品进行调查检测,包括种蛋表面(消毒前、消毒后和叮壳后)、孵化后期的死胚、1 d龄残次鸡、鸡白痢-禽伤寒(pullorum disease-fowl typhoid,PD-FT)抗体阳性种鸡和阴性种鸡等共1045份,其中1 d龄残次鸡以及PD-FT抗体阳性和阴性种鸡分别采集其不同内脏器官和泄殖腔棉拭子、死胚采集肝脏。参考Salnonella国家标准检验法并结合PCR检测方法,对样品进行》Sallmoonellla分离培养与检测,对分离到的Salmonella菌株的血清型进行确定。调查检测的结果显示,1045份样品共分离出167株Salnonella,分离率为15.98%;其中,不同环节样品的检出率分别为:消毒前蛋壳表面1.50%(3/200)、消毒后蛋壳表面0.50%(1/200)、叮壳胚蛋表面18.00%(36/200)、孵化后期死胚24.00%(48/200)、1 d龄残次鸡30.50%(61/200)、PD-FT抗体阳性种鸡的56.67%(17/30)和阴性种鸡的6.67%(1/15),说明种鸡、种蛋、孵化、出雏鸡等各环节均存在不同程度的Sablmoella污染,其中以垂直传播为甚;4家公司中以种鸡未开展净化的DGGX17公司污染情况最为严重,其1 d龄残次鸡的Salnonella检出率最高并且其它环节Sallmonella分离率也均分别高于其它3家公司,而其它3家公司则以PD-FT抗体阳性的种鸡的Salmonela检出率最高;167株Salmonella分离株血清型鉴定的结果显示,分离株均分布在4个血清群的4种血清型里,其中绝对优势的是D群的SP(98.20%,164/167),其次分别为C1群的S.infantis、C3群的S.kekeuchy和A群的S.koessen(均为0.60%,1/167)。鸡只不同内脏器官的分离培养结果显示,1 d龄残次鸡以肝脏的分离率最高(67.21%,41/61);30只PD-FT抗体阳性种鸡中有17只为带菌鸡,以卵巢分离率最高(52.94%,9/17),其次为输卵管和肝脏(47.06%,8/17)以及脾脏(41.18%,7/17);而泄殖腔棉拭子的分离率不管是种鸡还是1 d龄残次鸡的均为最低,其中种鸡分离率为(11.76%,2/17)、1d龄残次鸡为21.31%(13/61)。选用WHO推荐的K-B纸片扩散法对分离株进行16种常见抗生素的耐药表型检测。结果显示,167株Salmonella分离株对16种供试抗生素药物均产生不同程度上的耐药性,其中所有分离株对磺胺异恶唑全部耐药(耐药率100%,167/167),其次为萘啶酸(97.60%,163/167)、复方新诺明(96.41%,161/167)、阿莫西林(86.83%,145/167);而分离株对头孢噻肟、头孢曲松、环丙沙星及呋喃妥因等比较敏感;分离株的MDR检测结果显示,三重及以上耐药菌株数比例高达100%,61.08%(102/167)的分离株能耐受7种及以上的抗生素,甚至有3株分离株可耐测试的15种抗生素。SYF使用效果的评价试验中,160只1 d龄三黄鸡随机分为三个试验组A、B、C(每组50只)和一个空白对照组D(10只),在整个1d龄～42 d龄的试验期中,A组饲喂添加了25 ppm的SYF产品Safmannan的公司未添加抗生素的常规日粮、B组饲喂公司未添加抗生素的常规日粮并在饮水中添加有机酸产品Acidipure、C组和D组饲喂公司未添加抗生素的常规日粮,全程鸡只自由采食和饮水。7 d龄时,A、B、C组鸡随机平分为2组,分别经口感染SP和SG,攻毒后每周采用平板凝集试验(plate agglutination test,PAT)对鸡的血清中PD-FT抗体进行检测,并于试验结束时对所有鸡只进行活体称重、解剖,记录病变并按常规方法分离培养攻毒的细菌。结果显示,42 d龄时,攻毒组鸡只的平均体重(body weight,BW)均显著低于空白对照组(D组)鸡(P<0.05),Safmannan组(A组)的鸡只平均BW均显著大于Acidipure组(B组)和C组的(P<0.05);Safmannan组抗体阳性率及细菌分离阳性率均显著低于Acidipure组和C组(P<0.05),而D组鸡只则均为阴性;在Safmannnan的田间应用试验中,分别在一家商业父母代种鸡场的3群三黄鸡种鸡进行,其中试验一组(2 833只)饲喂添加了25 ppm的Safmannan的公司未添加抗生素的常规日粮、试验二组(2489只)饲喂公司未添加抗生素的常规日粮并在饮水中添加Acidipure试验三组(3 513只)饲喂公司未添加抗生素的常规日粮作为对照。试验鸡的鸡舍条件、饲养管理等均保持一致,试验期为1 d龄～120 d龄,试验的主要观察指标是120d龄鸡只上产蛋笼时的PD-FT抗体阳性检出率。结果显示,Safmannan组的抗体阳性率(5.78%,164/2 833)显著低于Acidipure组(13.98%,348/2489)和对照组(14.49%,509/3 513)的(P<0.05),而Acidipure组和对照组的阳性率相近,无显著性差异(P>0.05)。本课题研究的结果证明,当前广西各地种鸡公司各生产环节均存在不同程度的Sallonella污染,其中以垂直传播为甚,S.pullorum为绝对优势的血清型,其耐药及多重耐药现象严重;饲喂SYF可显著减少雏鸡SP和SG攻击后的感染率并显著改善因感染Salmonella而造成的体重减轻,同时显著减少种鸡因PD-FT抗体阳性而造成的淘汰率,而且效果均优于有机酸。