苯乙酸钠对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响

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目的研究苯乙酸钠在体外对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制和诱导凋亡的作用及机制。方法将处于对数生长期的MCF-7细胞以不同浓度的苯乙酸钠处理72小时后,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测吸光度(OD)值,计算细胞抑制率;采用流式细胞仪分析细胞周期改变和凋亡率;免疫细胞化学(ICC)法检测细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的变化;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞p21WAF1/CIP1 mRNA表达的水平。结果MTT比色法显示苯乙酸钠对MCF-7细胞的抑制率随浓度增大而增高,浓度15mmol/L的抑制率最大,为48.14%。流式细胞仪DNA直方图上加药组G1峰前出现亚二倍体峰(凋亡峰);定量分析示3、9、15mmol/L药物浓度下细胞凋亡率分别为4.16%、9.05%、11.12%,与对照组0.32%比较均有显著性差异(P <0.05);随着苯乙酸钠浓度的增高,处于G0/G1期的细胞逐渐增多,处于S期的细胞逐步下降。免疫细胞化学(ICC)法结果显示0、3、9、15mmol/L药物浓度下Bcl-2蛋白的细胞阳性率(出现棕黄色颗粒的细胞概率)分别为55.82%,45.29%,38.83%,31.56%,而Bax蛋白的细胞阳性率分别为:29.92%、44.92%、59.87%、69.58%。半定量RT-PCR检测结果显示p21WAF1/CIP1基因条带密度和相对表达值随浓度增加逐步增高。结论苯乙酸钠对人乳腺癌细胞株MCF-7有明显的生长抑制和诱导凋亡的作用,其作用机制可能与下调Bcl-2,上调Bax、p21WAF1/CIP1基因表达有关。
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