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目的：在体外试验系统,初步探讨线粒体电子传递功能障碍在Cr(Ⅵ)诱导细胞凋亡中的作用,进一步阐明Cr(Ⅵ)诱导细胞凋亡的可能机制。方法：以L-02肝细胞为受试细胞,通过MTT试验检测Cr(Ⅵ)及与呼吸抑制剂(DPI、ROT、AA)或保护剂(Vit C)联合作用对L-02肝细胞存活率的影响,筛选出25μmol/L Cr(Ⅵ)、2.5μmol/L DPI、5μmol/L ROT、lμg/mL AA和2mmol/L Vit C进行后续试验,染毒时间为12h。通过紫外可见分光光度计检测线粒体内Cr(Ⅵ)的还原速率,多功能酶标仪检测细胞内ATP含量和活性氧(ROS)的含量变化,氧电极检测细胞线粒体呼吸功能(耗氧速率),酶标仪检测细胞内caspase-3的活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率检测细胞凋亡结果：1.Cr(Ⅵ)引起L-02肝细胞存活率降低：Cr(Ⅵ)在10-100μmol/L处理浓度范围内,能明显引起L-02肝细胞存活率的降低(P<0.05),处理浓度和细胞存活率之间存在负相关(r12h=—0.980,P<0.05),选取对Cr(Ⅵ)处理的细胞生存率影响较明显2.5μmol/L DPI、5μmol/L ROT1μg/mL AA和2mmol/L Vit C进行后续试验。2.线粒体内Cr(Ⅵ)还原速率：不同呼吸底物对线粒体中Cr(Ⅵ)的还原速率的影响不同,复合体Ⅰ的底物苹果酸+谷氨酸使线粒体中Cr(Ⅵ)的还原量显著增加,而复合体Ⅳ的底物Vit C使线粒体中Cr(Ⅵ)的还原量明显降低(P<0.05)。不同呼吸抑制剂对线粒体中Cr(Ⅵ)的还原速率的影响不同(P<0.01)。复合体Ⅳ抑制剂NaN3时,线粒体中Cr(Ⅵ)的还原量最大(P<0.05)。3.Cr(Ⅵ)对肝细胞细胞呼吸功能影响：与对照组相比, Cr(Ⅵ)单独处理组细胞氧耗速率明显降低(P<0.05)；与相同浓度的Cr(Ⅵ)单独处理组相比,加入呼吸链抑制剂(DPI、ROT、AA)联合处理组细胞耗氧速率均明显降低(P<0.05),加入VitC联合处理组细胞耗氧速率明显增高(P<0.05)4.Cr(Ⅵ)对肝细胞ATP含量的影响：与对照组相比, Cr(Ⅵ)单独处理组ATP含量明显降低(P<0.05)；与相同浓度的Cr(Ⅵ)单独处理组相比,加入呼吸链抑制剂(DPI、ROT、AA)联合处理组ATP含量均明显降低(P<0.05),加入VitC联合处理组ATP含量明显增高(P<0.05)5.Cr(Ⅵ)对肝细胞氧化应激的影响：与对照组相比,Cr(Ⅵ)单独处理组细胞ROS产量明显增高(P<0.05)；与相同浓度的Cr(Ⅵ)单独处理组相比,加入呼吸链抑制剂(DPI、ROT、AA)联合处理组细胞ROS产量均明显增高(P<0.05),加入Vit C联合处理组ROS产量明显降低(P<0.05)。6.Cr(Ⅵ)对肝细胞caspase-3的影响：与对照组相比,Cr(Ⅵ)单独处理组caspase-3活性明显升高(P<0.05)；与相同浓度的Cr(Ⅵ)单独处理组相比,加入呼吸链抑制剂(DPI、ROT、AA)联合处理组细胞caspase-3活性该变量均明显升高(P<0.05),加入Vit C联合处理组细胞caspase-3活性明显降低(P<0.05)。7.Cr(Ⅵ)诱导肝细胞凋亡：与对照组相比,Cr(Ⅵ)单独处理组细胞凋亡率明显升高(P<0.05)；与相同浓度的Cr(Ⅵ)单独处理组相比,加入呼吸链抑制剂(DPI、ROT、AA)联合处理组细胞凋亡率均明显升高(P<0.05),加入Vit C联合处理组细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。结论：1.Cr(Ⅵ)从线粒体复合体Ⅰ得到电子而被还原,在此还原过程中产生ROS,产生的ROS诱导线粒体损伤和细胞凋亡因子caspase-3释放,从而诱导L-02肝细胞凋亡。2.主呼吸链抑制剂(尤其是ROT)能使呼吸链电子从复合体Ⅰ漏出,使Cr(Ⅵ)还原增加,使Cr(Ⅵ)诱导细胞凋亡的作用增强。3. VitC能减轻Cr(Ⅵ)引起的线粒体损伤,使线粒体呼吸功能部分恢复,使细胞内ATP水平升高,影响caspase3的活性,拮抗Cr(Ⅵ)诱导的细胞凋亡。4.在Cr(Ⅵ)诱导的L-02肝细胞凋亡过程中,电子传递功能障碍起重要作用。