第一部分嗅鞘细胞的原代培养及纯化和形态学观察实验一:新生大鼠嗅鞘细胞的原代培养及形态学观察目的:探讨新生大鼠嗅鞘细胞的原代培养及纯化方法并对其形态学特征进行观察。方法:分离培养新生大鼠嗅球中的嗅鞘细胞,联合应用差速贴壁法和阿糖胞苷抑制法进行纯化,NGFRp⁷⁵免疫组化染色鉴定细胞。结果:可获得较高纯度的嗅鞘细胞,其形态主要为双极,多极和无突起的“油煎蛋”形,细胞突起细长并交织成网状。结论:该方法步骤简便,可重复性好,具有较高的实用价值。实验二:成年大鼠与新生鼠嗅鞘细胞形态学和生长特性差异的研究目的:对成年大鼠和新生鼠嗅鞘细胞的形态学和生长特征的差异进行观察。方法:使用相同培养纯化方法分别培养成年大鼠和新生鼠嗅球表层中的嗅鞘细胞, NGFRp⁷⁵免疫组化染色鉴定细胞并观察不同时期两者嗅鞘细胞的形态差异和生长速度。结果:均可获得较高纯度的嗅鞘细胞,但两类细胞在生长特征和形态学上略有差异。结论:成年大鼠和新生鼠嗅鞘细胞形态学和生长特征有差异。第二部分:壳聚糖的生物相容性研究实验一:壳聚糖与大鼠嗅鞘细胞生物相容性的研究目的:研究壳聚糖与大鼠嗅鞘细胞的生物相容性。方法:将大鼠嗅鞘细胞接种至壳聚糖包被的培养板上共同培养,观察嗅鞘细胞在膜上的形态及生长增殖情况,并与对照组相比较。结果:嗅鞘细胞可在壳聚糖膜上贴壁生长,细胞形态及数量与空白对照组相比无显著差异,但与赖氨酸包被组相比细胞数量偏低。结论:嗅鞘细胞与壳聚糖有良好的生物相容性。实验二:壳聚糖膜在大鼠脊髓组织的降解与生物相容性研究目的:研究壳聚糖膜在大鼠脊髓组织的降解与生物相容性。方法:将36只SD大鼠随即分为实验组和对照组,将壳聚糖膜和医用丝线分别植入脊髓组织,于术后7,14,28天测定壳聚糖膜的重量并评估局部组织炎性反应。结果:壳聚糖膜的降解率分别为14.8% ,18.9% ,25.0%,壳聚糖膜和医用丝线在植入局部引发的炎症反应类似。结论:壳聚糖膜易于降解并与脊髓组织有良好的生物相容性,是一种可应用于脊髓损伤修复的新型生物材料。第三部分:壳聚糖导管联合嗅鞘细胞移植修复大鼠脊髓损伤的研究目的:研究壳聚糖导管联合嗅鞘细胞（OEC）移植对SD大鼠脊髓损伤的修复作用。方法:原代培养新生SD大鼠嗅鞘细胞并建立脊髓损伤动物模型,将壳聚糖导管和OECs植入脊髓损伤处（实验组）,设立单纯嗅鞘细胞移植组和单纯壳聚糖导管植入组为实验对照A,B组,脊髓损伤+DMEM-F12培养基注射组为空白对照组。术后评估大鼠后肢运动功能恢复情况,分别于2,4,6,8周取材进行组织学观察。结果:嗅鞘细胞可在脊髓损伤局部存活并促进轴突再生,壳聚糖导管可桥接脊髓两断端,对轴突再生提供支架作用。结论:嗅鞘细胞移植联合壳聚糖导管植入具有促进脊髓损伤后神经再生和运动功能恢复的修复作用。