党参多糖提取工艺优化、理化特性及抗氧化活性研究

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党参是一种多年生草本植物,主要分布于东亚、东南亚和中亚,最常见的种有柳叶党参、毛党参等。据记载,它们作为传统中药有着悠久的历史,常被用作健脾补肺、养血生液等。在中国的南部和东南亚地区,有些种类是被当作食材,例如茶、酒、汤、膏和粥。党参具有广泛的生物学活性,因此在中草药中具有重要的地位。党参是我国一种重要的中草药,其主要活性成分之一是多糖。本研究采用热水浸提法从党参根中提取粗多糖,并对其提取条件、理化性质、结构特征、分子量、单糖组成等进行了研究,测定了其抗氧化活性,以期能够发现其作用机理,提高其功能特性。采用Box-Behnken设计(BBD)和响应面法(RSM),依据单因素实验和专业设计软件确定了等高线图、曲面图等RSM的最佳提取条件。主要内容如下:采用热水法提取党参多糖,采用3500Da截流的透析袋透析48h进行纯化。根据单因素实验,采用Box-Behnken设计和响应面法对提取工艺进行优化。采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用排阻色谱结合多角度光散射分析(SEC-MALS)计算HW-CPPs的分子量。分别使用荧光光谱、动态光散射(DLS)、刚果红(CR)、圆二色性(CD)、x-射线衍射分析(XRD)和扫描电子显微镜观察(SEM),对提取的HW-CPPs进行了进一步的表征,包括其在水溶液中的自缔合行为、链的构象、尺寸分布结构以及成分信息的确定。研究结果表明,在最佳提取工艺(固-液比为1:12.6 g/mL、颗粒大小为72目、温度为60℃、提取时间为60 min时),粗多糖的产率最高可达13.606%。采用排阻色谱结合多角度光散射分析(SEC-MALS)计算得出HW-CPPs分子量为3.69×10~4。单糖组成分析表明:HW-CPPs是酸性杂多糖,主要含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖。此外,采用刚果红(CR)结合试验、圆二色谱(CD)法、X射线衍射(XRD)和紫外-可见分光光度法研究证实:HW-CPPs具有三重螺旋空间构象和半晶态结构,且存在一定的杂质。其粒度分布采用动态光散射(DLS)和扫描电镜(SEM)进行分析,结果显示多糖呈中等程度的多分散团聚体。扫描电镜观察显示HW-CPPs具有光滑的纤维结构。此外,本研究还探讨了HW-CPPs的抗氧化活性,测定了它对DPPH、ABTS+、羟基自由基的清除作用和对铁还原力的影响。结果表明,党参多糖具有一定的体外抗氧化活性。综上所述,本研究获得了一整套关于党参多糖的提取、优化、表征及生物活性评价的结果,对党参多糖的综合开发具有重要的应用价值。
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