磷酸化JNK在高温致神经管畸形中的表达及研究

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目的:通过研究高温致金黄地鼠NTD的动物模型,检测磷酸化JNK(P-JNK)在高温致神经管畸形中的表达水平,分析其在高温致神经管畸形的表达及意义。方法:成年未经产雌性金黄地鼠,于晚19~21时与雄鼠1∶1合笼,次日做阴道涂片,查有精子者定为受孕第1d。将孕鼠随机分为实验组和对照组,实验组和对照组又各分为3个小组。实验组于受精第8天16~17时置42℃水浴,持续20min,对照组37℃水浴20min。各实验组孕鼠分别于高温处理后第9天第10天第11天剖腹取胎,在光学解剖显微镜下迅速剥离神经管放置液氮内冻存备用。对照组在相应时间取材。用Western blot方法检测P-JNK在实验组和对照组神经上皮中的表达。结果:温度42℃持续20min时胚胎吸收率和死亡率之和为20%左右,神经管发生率近80%,即几乎所有活胎均有神经管畸形;在预染蛋白Marker约46kD处,见P-JNK的特异性的蛋白条带,实验组各组之间相比明显有差异(P<0.01),而对照组各组之间相比无差异(P>0.05);实验组P-JNK蛋白表达增高,9与10天实验组P-JNK蛋白表达升高,与9和10天对照组相比有显著差异(P<0.01),11天实验组P-JNK蛋白表达较9与10天实验组P-JNK蛋白表达有所下降,但仍高于11d对照组P-JNK蛋白表达,两者相比有明显差异(P<0.01)。结论:P-JNK蛋白表达异常提示P-JNK有可能参与高温致神经管畸形的形成。
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