两种多酚类化合物分子印迹整体柱的制备及其应用

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柯里拉京和1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖(以下简称β-PGG)两种单体均属于多酚类化合物。二者广泛存在于天然植物中,具有多种生理学和药理学活性。因此,二者在医学、保健等诸多领域具有重要的应用价值。但由于二者在天然植物中的含量比较低,同时,由于天然植物提取物中的成分比较复杂,使得二者的分离纯化相对比较困难。因此,一种简单、快速、高效的分离纯化技术显得十分重要。本文利用原位聚合的方法,合成了柯里拉京和β-PGG两种多酚分子印迹整体柱,并以这两种多酚印迹聚合物作为固相萃取的吸附剂,实现了两种多酚化合物从天然植物粗提物中的纯化。主要结果如下:  1.合成了柯里拉京分子印迹整体柱,并将印迹聚合物应用于固相萃取,成功的从叶下珠粗提物中纯化出柯里拉京和没食子酸。具体过程如下:将模板柯里拉京溶解于三元致孔剂1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([BMIM]BF4)/二甲亚砜(DMSO)/NN-二甲基甲酰胺(DMF)中,随后加入功能单体4-乙烯基吡啶(4-VP),交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)和引发剂偶氮二异丁腈(AIBN),得到预聚混合物。将预聚混合物超声,得到均一的混合物。然后将其装入不锈钢柱中,用生料带将不锈钢柱的两端进行密封,放入60℃水浴中反应18h,便可制得柯里拉京分子印迹整体柱。最优化合成条件:n(柯里拉京)∶n(4-VP)∶n(EDMA)=1∶10∶40;所得整体柱对于柯里拉京的印迹因子可以达到9以上。另外,本文把柯里拉京分子印迹聚合物作为固相萃取的吸附剂,对叶下珠粗提物分离纯化条件进行了优化,最优化条件:①淋洗试剂:水--30mL,接着乙腈/水(2/8,v/v)--20mL;②洗脱试剂:乙腈/水(4/6,v/v)--40mL。分离纯化结果:在保证柯里拉京和没食子酸的纯度均高于98%以上的前提下,二者的回收率分别为71.8%和94%。  2.合成了β-PGG分子印迹整体柱,并将该印迹聚合物作为固相萃取填料,成功的从白芍粗提物中纯化出β-PGG。具体过程如下:将模板β-PGG,功能单体4-VP,交联剂EDMA,桥接剂金属离子,亲水性大分子寡聚甲醚甲基丙烯酸酯(以下简称OEG),引发剂偶氮二异丁腈和三元致孔剂1-丁基-3甲基咪唑四氟硼酸盐/二甲亚砜/NN-二甲基甲酰胺混合,得到预聚混合物。将预聚混合物超声,得到均一的混合物。然后将其装入不锈钢柱中,用生料带将不锈钢柱的两端进行密封,放入60℃水浴中反应18h,便可制得β-PGG分子印迹整体柱。最优化合成条件:n(β-PGG)∶n(4-VP)∶n(EDMA)=1∶6∶33,n(4-VP)∶n(镍离子)∶n(OEG)=1∶1∶1,金属离子为镍离子,OEG分子量为300g mol-1,所得整体柱对于β-PGG的印迹因子可以达到73以上。另外,本文把β-PGG分子印迹聚合物作为固相萃取的吸附剂,对白芍粗提物分离纯化条件进行了优化,最优化条件:①淋洗试剂:甲醇/水(7/3,v/v)--30mL;②洗脱试剂:乙腈/水(9/1,v/v)--10mL。分离纯化结果:在保证β-PGG的纯度高于98%以上的前提下,其回收率为74.1%。
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