【摘 要】
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目的研究芍药苷对PC12细胞的保护作用,并探讨其对自噬-溶酶体通路的影响。方法环境毒素MPP+诱导PC12细胞损伤,同时给予芍药苷进行干预,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、乳酸脱氢
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目的研究芍药苷对PC12细胞的保护作用,并探讨其对自噬-溶酶体通路的影响。方法环境毒素MPP+诱导PC12细胞损伤,同时给予芍药苷进行干预,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、乳酸脱氢酶(LDH)和流式细胞技术检测细胞存活率、损伤程度、凋亡率及细胞内游离钙离子浓度的变化,Western blot检测细胞内LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和Lamp2a蛋白表达水平的变化。结果MPP+处理24 h,PC12细胞的存活率显著降低(P<0.001),漏出至上清液中的LDH较正常对照组显著增多(P<0.001),同时细胞凋亡率也显著升高(P<0.001),细胞内钙离子浓度增加(P<0.01)。芍药苷(50μmol·L-1)提高了PC12细胞的存活率(P<0.001),减少了LDH的漏出(P<0.001),降低了细胞凋亡率(P<0.001),抑制了钙内流(P<0.01)。Western blot显示MPP+处理导致LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的表达水平显著降低,分别是正常水平的0.64±0.05倍(P<0.01)和0.58±0.10倍(P<0.01),同时Lamp2a蛋白表达升高至正常水平的1.34±0.14倍(P<0.05),而芍药苷能够显著提高LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的表达水平(P<0.05),并抑制了Lamp2a的异常激活(P<0.001)结论芍药苷对PC12细胞具有明显的保护作用,并能拮抗MPP+对自噬-溶酶体通路的影响。
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