【摘 要】
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目的:复制STZ诱导I型糖尿病模型,探究大黄素甲醚对实验性I型糖尿病小鼠的保护作用,复制细胞因子诱导RINm5F细胞凋亡模型,研究其抗胰岛β细胞凋亡的作用。方法:1.动物实验:将
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目的:复制STZ诱导I型糖尿病模型,探究大黄素甲醚对实验性I型糖尿病小鼠的保护作用,复制细胞因子诱导RINm5F细胞凋亡模型,研究其抗胰岛β细胞凋亡的作用。方法:1.动物实验:将雄性SPF级健康昆明小鼠40只随机分为:正常对照组、I型糖尿病模型组、大黄素甲醚大剂量组(40mg/kg/d)、小剂量组(20mg/kg/d)。除正常对照组外,其余各组小鼠连续5天腹腔注射STZ溶液,1周后,给药组连续腹腔注射大黄素甲醚28d。称量给药前后各组动物体重,血糖仪测其每周空腹血糖。ELISA法检测小鼠血清中NO、i NOS、胰岛素水平,石蜡包埋切片,TUNEL凋亡检测法测其胰岛β细胞凋亡。2.细胞实验:复制细胞因子IFN-γ(100U/ml)和IL-1β(1U/ml)诱导RINm5F细胞凋亡病理模型。各给药组预孵育4h后给予细胞因子刺激,共同孵育24h,以分子生物学技术检测细胞存活率、caspase-3活化、PARP活化、NO、i NOS水平以及NF-κB的活化。Prism软件分析数据。结果:动物实验:模型组小鼠的体重随时间增加较同期正常组明显降低(P<0.05),给药组大剂量组较模型组,能明显增加同时间点的体重(P<0.05)。模型组小鼠第一周空腹血糖值较正常组升高,并持续稳定升高至第四周,胰岛素水平明显下降,i NOS活性和NO含量显著升高,大剂量给药组能持续减缓血糖的升高,对抗胰岛素水平降低和i NOS、NO的增加(P<0.05)。TUNEL染色镜下可见模型组凋亡细胞数目显著增加且大黄素甲醚大剂量组(40mg/kg/d)可以显著抑制细胞凋亡。细胞实验结果显示:模型组较之正常组,随细胞存活率的降低,caspase-3的活化水平,NO及i NOS均显著升高,p65向核内转移。而大黄素甲醚能有效拮抗细胞因子诱导的β细胞凋亡(P<0.05)。结论:大黄素甲醚(40mg/kg/d)对I型糖尿病小鼠胰脏β细胞具有保护作用。大黄素甲醚(5μM和10μM)能对抗IL-1β和IFN-γ诱导的胰岛β细胞凋亡,其机制与抑制NF-κB活化和i NOS表达有关。
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