黑蒜提取液抑制小鼠胰腺癌Panc-1细胞增殖和转移的体内外研究

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目的:探讨黑蒜提取液抑制胰腺癌Panc-1细胞的增殖与转移的机制,本实验主要研究TGF-β1/Smad4信号转导通路在胰腺癌发展与后期转移中的相关分子的作用与机制。方法:选择胰腺癌Panc-1细胞作为实验研究对象,并将实验过程具体分为两部分:体内实验与体外实验。体外实验为:CCK-8检测黑蒜提取液干预后,Panc-1细胞的生长变化;Realtime-PCR法检测黑蒜提取液对Panc-1细胞中TGF-β1以及MMP-9基因表达情况。Western Blot法检测黑蒜提取液对Panc-1细胞TGF-β1与Smad4蛋白表达含量变化。Transwell法检测黑蒜提取液对胰腺癌Panc-1细胞侵袭能力的调节作用;体内实验包括:小鼠胰腺癌Panc-1细胞实体瘤模型和小鼠胰腺癌Panc-1细胞转移性模型建立;观察黑蒜提取液对荷瘤小鼠Panc-1细胞瘤体生长抑制情况以及实验性转移模型中肝脏转移抑制率的情况;免疫组织化学分析法检测黑蒜提取液对荷Panc-1小鼠移植瘤中TGF-β1以及Smad4蛋白表达情况。结果:(1)黑蒜提取液体外实验可降低Panc-1细胞活性,明显的降低细胞生长抑制率。(2)黑蒜提取液体外能够上调Smad4蛋白表达、下调TGF-β1蛋白的表达来调节TGF-β1/Smad4信号通路的活化,而且能够抑制TGF-β1与MMP-9基因表达能力,从而抑制细胞运动能力,进而抑制癌细胞的转移。(3)黑蒜提取液可减少荷瘤Panc-1小鼠体内胰腺癌的肝脏转移率,并影响小鼠体内TGF-β1/Smad4通路肿瘤转移相关蛋白的表达。结论:黑蒜提取液可能通过上调荷Panc-1小鼠移植瘤中Smad4的表达并下调TGF-β1的表达来调控TGF-β1/Smad4信号转导通路的活化,从而对胰腺癌Panc-1细胞的增殖与转移发挥重要的调控作用。
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