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近年来,水产养殖甲壳类病害的频发给人们的生产和生活造成巨大损失。开发和利用新型免疫增强剂可以为病害防治带来新的思路。CpG ODNs(CpGoligodeoxynucleotides),是一类含有未甲基化的CpG基序并具有免疫激活能力的寡聚核苷酸,属于一种新型的免疫增强剂。本研究着重探讨了CpG ODNs在虾、蟹等甲壳类动物中的免疫增强作用机制以及在甲壳类养殖业中大规模应用的可能性。通过用CpG ODN2395体外处理凡纳滨对虾的血细胞,我们发现其能够显著增强血细胞中TNF-α的活力,并且上调NO的水平;同时,在凡纳滨对虾中发现Toll样受体LvTLR1和LvTLR3具有结合CpG ODN2395的能力。根据氯喹抑制实验,发现抑制内体酸化后由CpG ODN2395刺激所引起的TNF-α和NO的变化均消失。结合激光共聚焦显微镜对CpG ODN2395的入胞情况的观测,结果表明内体的成熟是CpG ODNs与LvTLRs识别并结合的关键环节。因此,可以推测,CpG ODNs所诱发的免疫效应可能是由Toll信号通路所介导和激活的。本研究利用凡纳滨对虾对CpG ODNs的免疫增强效果进行评价。研究表明,具有多CpG模体串联结构的CpG ODNs在调节凡纳滨对虾血细胞稳态和免疫力等方面有着重要作用。CpG ODNs可以通过提升细胞凋亡水平和新生循环细胞数目来调节血细胞稳态。与此同时,它还能够促进血细胞的吞噬能力和机体活性氧水平上升。通过投喂实验来探讨CpG ODNs在甲壳类动物养殖中的应用前景。研究表明,投喂CpG ODNs添加饲料后,中华绒螯蟹的溶菌酶和过氧化氢酶活力显著上升;并且攻毒后,能比较有效的保护中华绒螯蟹免受病原体的侵染。同时,投喂CpG ODNs添加饲料的中华绒鳌蟹的相对增重率显著升高。通过定位实验,发现CpG ODNs可以被细胞以膜泡依赖的内吞过程所内化,并最终定位于溶酶体。综上所述,作为一种新型的免疫增强剂,CpG ODNs可能通过细胞内化过程,激活Toll信号通路,进而激活虾、蟹类的固有免疫系统。饲料添加CpG ODNs是一种可行且有效的利用途径,可以大规模推广使用。