苜蓿皂苷调控断奶仔猪肝脏代谢的关键蛋白筛选

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本文研究了苜蓿皂苷对大白×长白二元杂交断奶仔猪生长性能、免疫性能、抗氧化性能、肠道pH、肠道微生物、脏器指数以及肝脏蛋白质表达等方面的影响。试验结果如下所述:试验一:按照品种、日龄、胎次、体重尽可能一致的原则,选取健康体重约8.0 kg的大长二元杂交仔猪48头(阉公猪及小母猪各24头),采取4处理3重复单因子完全随机设计。对照组饲喂基础饲粮,处理组为在基础日粮中各加入0.125%(试验I组)、0.25%(试验II组)和0.5%(试验III组)的苜蓿皂苷。结果表明:(1)饲粮中加入苜蓿皂苷后,仔猪的腹泻率呈下降趋势;日增重差异不显著,最高的为试验II组;添加苜蓿皂苷过高(0.5%)会降低仔猪的日增重和日采食量,且料重比升高。(2)三个苜蓿皂苷处理组白细胞和红细胞的数量及血红蛋白的含量均高于对照组,且试验II组的白细胞数量最高;添加苜蓿皂苷对血小板数量的影响没有明显规律。(3)试验II、III组总蛋白(TP)含量极显著、显著高于对照组和试验I组;试验II、III组白蛋白(ALB)含量高于对照组;随着苜蓿皂苷添加量的增加,球蛋白(GLB)的含量也有升高趋势;试验II、III组白球比(ALB/GLB)与对照组差异极显著,试验I组与对照组差异显著;苜蓿皂苷处理组谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)均低于对照组;试验I组和II组碱性磷酸酶(ALP)含量均高于对照组;试验II组葡萄糖(GLU)和尿素氮(UN)含量高于其它组;免疫球蛋白G(IgG)含量最高的为试验II组;免疫球蛋白M(IgM)含量最高的为试验III组,II组次之。(4)苜蓿皂苷对血清丙二醛(MDA)的含量有一定的降低作用,试验III、I组MDA的含量极显著、显著低于对照组;饲粮中添加苜蓿皂苷对血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性没有明显作用;试验II组与III组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性差异显著,最高的为试验II组;苜蓿皂苷可以提高仔猪血清中总抗氧化能力(T-AOC),但差异不显著。试验二:试验结束后分别选取对照组和0.25%苜蓿皂苷组仔猪6头(每个重复2头)进行屠宰,对其组织中相关抗氧化指标进行检测。结果显示:(1)苜蓿皂苷可以降低仔猪肝脏、肾脏、脾脏中MDA的含量,提高其T-AOC;苜蓿皂苷可以极显著提高脾脏中SOD的活性,肝脏和肾脏中此酶活性差异不明显;试验II组肾脏中GSH-PX活性极显著高于对照组;试验II组肝脏、肾脏和脾脏中过氧化氢酶(CAT)活性均高于对照组,且在肾脏部位极显著高于对照组,肝脏部位显著高于对照组。(2)苜蓿皂苷可以提高仔猪肝脏、十二指肠、空肠和回肠中CAT mRNA的表达量,且对十二指肠和回肠有极显著影响;苜蓿皂苷可以显著、极显著提高仔猪肝脏、空肠中GSH-PX mRNA的表达量;苜蓿皂苷对仔猪肝脏、十二指肠、空肠和回肠中SOD mRNA的表达量没有明显影响。试验三:试验结束后分别选取对照组和0.25%苜蓿皂苷组仔猪6头,对其消化生理相关指标进行检测。结果如下:(1)饲粮中添加苜蓿皂苷可以显著降低仔猪十二指肠和盲肠的pH值,但对空肠和回肠的pH值没有明显影响。(2)饲粮中添加苜蓿皂苷可以降低仔猪空肠、回肠和盲肠中大肠杆菌的数量,但与对照组差异不显著;添加苜蓿皂苷可以提高仔猪空肠、回肠和盲肠中乳酸菌的数量,尤其是能极显著提高盲肠乳酸菌的数量。(3)苜蓿皂苷组胸腺指数明显高于对照组;饲粮中添加苜蓿皂苷对仔猪肝脏、胰腺和肾脏的发育具有一定的促进作用,但差异不显著。试验四:对对照组和0.25%苜蓿皂苷组的仔猪肝脏组织进行采样,每个组采集3个生物学重复,送由北京蛋白质组研究中心检测。结果如下:(1)依据设定的标准,共筛选出差异蛋白104个,其中苜蓿皂苷处理后表达上调的蛋白有39个,表达下调的蛋白有65个。(2)GO分析显示其主要参与的生物学过程有新陈代谢、生物调节、细胞代谢过程、外界刺激反应、免疫反应和定位等;主要为氧化还原酶、转移酶、水解酶、核酸结合酶和连接酶等。
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