基于PEG-b-PS自组装结构及其作为光敏剂载体的抗肿瘤活性研究

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光动力疗法(PDT,photodynamic therapy)是一种利用特定波长的光照射光敏剂使其产生活性的治疗方法。在PDT治疗过程中,同时需要高效的光敏剂、分子氧以及特定波长的光照才能产生ROS氧化损伤肿瘤细胞和肿瘤组织。在无光照情况下光敏剂的细胞和组织毒性非常弱,因此PDT治疗相比其他疗法具有更少的副作用,近年来得到了一定的发展。酞菁作为一种优良的光敏剂,因其良好的生物相容性和光敏抗肿瘤活性而倍受关注。目前在PDT用于肿瘤的治疗中,存在一些缺陷:首先,肿瘤细胞由于增殖迅速且排列致密,使得其内部血管畸形且微环境内处于乏氧环境,不利于PDT效果的发挥;其次,光敏剂在PDT治疗中存在靶向性不足的问题,这会导致达到病灶部位的光敏剂含量低从而降低活性;此外,在传统的用于PDT治疗的光敏剂中,1O2作为最重要的活性氧,因其寿命短(小于40 ns)、有效范围小(约20~40 nm)限制了其活性的发挥,从而降低了PDT的抗肿瘤活性。为解决上述问题,本论文合成了一种由两亲性嵌段共聚物PEG-b-PS自组装形成的纳米碗,将纳米四氧化三铁及新酞菁光敏药物负载于该纳米碗上。获得了具有磁性靶向的、可催化H2O2分解产氧并具有运动功能的纳米马达药物,实现高效的PDT肿瘤治疗。具体研究内容如下:1、本章通过ATRP法合成不同聚合度的PEG-b-PS作为原料,研究包括溶剂混合方式、溶剂混合速率、环境温度、亲水链段聚合度、添加剂等因素对PEG-b-PS自组装结构形貌和尺寸的影响,通过TEM筛选出最优自组装方式以获得尺寸在300 nm左右的类碗状结构的囊泡。随后,选用不同方法制备了四种Fe3O4。通过对颗粒尺寸、理化性质筛选后发现三乙二醇(TEG,triethylene glycol)修饰的Fe3O4及四取代甲酸钠盐ZnPc可在PEG-b-PS碗状囊泡中高效负载,此外,还验证了TEG修饰的Fe3O4纳米粒子的H2O2催化能力。利用DBU(1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene)催化法合成了两种锌酞菁(ZnPc)光敏药物,并且通过装载情况最终确定光敏剂选择四取代甲酸钠盐酞菁。2、本章制备了IS-NMs纳米马达药物用于解决药物分布、靶向和乏氧等问题,研究了TEG修饰的Fe3O4及四取代甲酸钠盐ZnPc在PEG-b-PS碗状囊泡的装载量,检测了IS-NMs催化H2O2分解产生产氧气的能力、氧气驱动的运动特性及体外体内抗肿瘤活性等重要性能。研究表明,IS-NMs可高效催化H2O2分解产生产氧气,在200μM的H2O2水溶液中,IS-NMs的运动速度可达到1665 nm/s,远高于其布朗运动时的速度307 nm/s。体外细胞实验标明,负载酞菁后的ISP-NMs可被肿瘤细胞高效摄取,并在细胞内催化H2O2分解产生氧气并推动其运动。此外,在体内荷瘤动物实验中,核磁成像和荧光成像结果均证明在体外磁场作用下,IS-NMs具有良好的肿瘤组织磁性靶向能力。且与ZnPc相比,IS-NMs的PDT抗肿瘤活性显著提升。
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