参芪扶正注射液对胰腺癌细胞恶性生物学表型影响和分子机制研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hehong405
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目的:探讨参芪扶正注射液对人胰腺癌Mia-PaCa-2细胞,在恶性生物学表型方面的影响(增殖、迁移、凋亡等),及初步的分子机制研究。材料与方法:材料:人胰腺癌Mia-PaCa-2细胞和参芪扶正注射液。方法:(1)利用MTT实验,观察参芪扶正注射液随着倍比稀释药物浓度及作用时间的改变对人胰腺癌Mia-PaCa-2细胞增殖情况的影响;(2)利用流式细胞仪和凋亡检测试剂盒检测不同浓度参芪扶正注射液作用下对人胰腺癌Mia-PaCa-2细胞的凋亡情况的影响;(3)利用Transwell小室模型,观察参芪扶正注射液对人胰腺癌Mia-PaCa-2细胞迁移能力的影响;(4)利用Western blot实验,检测参芪扶正注射液对Bcl-2、ProCaspase-9、CleavedCaspase-9蛋白表达情况影响,初步探索可能的分子机制。结果:1.MTT实验显示,参芪扶正注射液对人胰腺癌Mia-PaCa-2细胞的增殖有抑制作用,呈时间浓度依赖性,24h、48h、72h最高抑制率分别为40%、47%、51%,同一浓度比较,72h时细胞抑制率大于24h组,有统计学意义,P<0.05。与48h实验组比较,干预因素作用72h后,在0.08g/ml和0.16g/ml药物浓度条件下无显著性差异,P>0.05。2.流式细胞仪检测发现参芪扶正注射液(浓度0.16g/ml)能够促进人胰腺癌Mia-PaCa-2细胞的凋亡,对照组比药物组凋亡率低,有统计学意义,P<0.05。3.Transwell小室模型实验,表明参芪扶正注射液能够抑制人胰腺癌Mia-PaCa-2细胞的迁移能力,且具有浓度依赖性,P<0.05。4.Western blot实验,发现在参芪扶正注射液处理的人胰腺癌Mia-PaCa-2细胞,Bcl-2、ProCaspase-9蛋白表达量,呈现随药物浓度增加而减少的趋势,P<0.05;而CleavedCaspase-9蛋白表达量,呈现随着药物浓度增加而增加的趋势,P>0.05。结论:参芪扶正注射液能够抑制人胰腺癌Mia-PaCa-2细胞的体外增殖和迁移;初步的机制研究表明,参芪扶正注射液可能通过下调凋亡蛋白Bcl-2、ProCaspase-9的表达和上调CleavedCaspase-9的表达,促进人胰腺癌Mia-PaCa-2细胞凋亡。提示参芪扶正注射液对胰腺癌的治疗具有潜在的应用价值。
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