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研究目的:
肠神经系统(enteric nervous system,ENS)是肠壁内的内源性神经系统,是具有多突触联系的复杂神经网络。ENS既受外源性自主神经(交感和副交感神经)的调控,又可独立于自主神经实现胃肠功能的局部调节。ENS控制着胃肠道的运动、分泌、血流及物质转运等功能,其功能异常与许多胃肠道疾病有着密切的关系,如腹泻,炎症,便秘,肠易激综合症等。长期高脂饮食可导致胃肠功能的异常,表现为胃排空加快,肠动力改变(不同肠段变化不同),肠粘膜分泌功能紊乱等,进一步促进肥胖、高脂血症以及心脑血管疾病的发生发展。近期研究发现,高脂饮食可引发肠神经信号改变,其与胃肠功能异常存在紧密的联系,是单次或长期高脂饮食所致健康问题(胃肠功能异常、肥胖及相关疾病)的重要机制之一。
目前有关运动对胃肠功能的影响多是基于对整体功能外在表现的观察,其亚微结构及其相关机制的研究不深入,尤其是运动对肠神经系统的影响及其与健康的关系,我们所知更少。
因此,本研究以高脂饲料喂养SD大鼠,并以长期有氧运动作为干预方式,通过观察分析胃肠功能、肠神经的支配及分布、SP和VIP能神经重塑等,阐述ENS对运动和高脂饮食的适应性重塑表现,并从ENS的视角探讨高脂饮食和有氧运动对胃肠功能的影响,进而丰富和发展“运动与自主神经”这一研究领域的相关理论和研究实践,而且为阐明运动减控体重、运动性相关胃肠功能紊乱的自主神经机制奠定基础。
研究方法:
32只SPF级8周龄雄性SD大鼠随机分为4组:安静组(C组)、高脂组(HF组),中等强度运动组(E组)、中等强度运动结合高脂组(FE组),每组8只大鼠。C组和E组用基础饲料喂养,HF组和FE组采用高脂饲料喂养。每周称重两次,每天记录摄食量。运动组大鼠进行为期10周不负重游泳训练(一周的适应性训练后进行正式训练,训练方案为:6次/周,1h/次,每周休息1天)。末次训练结束24小时后取材测试。分别进行小肠吸收和小肠推进试验,称重内脏脂肪,分离血清测试血脂四项。采用免疫组化技术分别测试回肠PGP9.5、VIP、SP的阳性表达,HE染色观察小肠形态结构改变。
研究结果:
1、HF、E、FE组体重均值低于C组,但各组体重无显著性差异(P>0.05);C、E组的摄食量无显著性差异(P>0.05),HF和FE组摄食量明显低于C、E组(P<0.01)。HF组的内脏脂肪重量显著高于C组(P<0.05)和E组(P<0.01),FE组内脏脂肪重量显著低于HF组降低(P<0.05); FE、E组和C组之间的内脏脂肪重量无显著性差异(P>0.05)。
2、与C组相比较,HF组血清TC含量非常显著升高(P<0.01),TG、HDL、LDL无显著性交化(P>0.05);E组TC显著降低(P<0.05),TG非常显著降低(P<0.01),HDL非常显著升高(P<0.01),LDL无显著性变化(P>0.05);FE组TC无显著性变化(P>0.05),TG非常显著降低(P<0.01),HDL非常显著升高(P<0.01),LDL无显著性变化(P>0.05)。与HF组相比较,FE组TC显著降低(P<0.05),TG非常显著降低(P<0.01),HDL非常显著升高(P<0.01),LDL无显著性变化(P>0.05)。
3、回肠形态学结果:与C组比较, HF组回肠肌纤维排列比较疏松,肌层的纵形肌和环形肌变厚,出血点明显,粘膜层变厚,神经团块部位出现空泡;FE组肌纤维排列相对紧密且规则,环形肌和纵形肌相对变厚,有少量出血点,神经团块部位出现空泡,粘膜层较厚;E组肌纤维排列非常紧密且规则,纵形肌与C组比较无明显的变厚,但是环形肌肉非常明显的变厚,无出血点和空泡,且粘膜层增厚。
4、小肠动力和小肠吸收率:E组小肠吸收非常显著高与C组、FE组(P<0.01)和HF组(P<0.05); FE组和HF组比较,无显著性差异(P>0.05)。与C组相比较,E组和HF组小肠推进率非常显著降低(P<0.01);E组小肠推进率显著低于 PE组(P<0.05)
5、PGP9.5阳性表达:免疫组化染色显示PGP9.5免疫反应阳性细胞呈棕色。E组、FE组、HF组、C组PGP9.5的表达量依次降低,E组PGP9.5阳性表达量明显高于C和HF组。各组神经呈团状,在回肠的肌层和粘膜层分布,尤以肌间多见。
6、VIP和SP阳性表达:与C组比较,HF组VIP的阳性表达量无显著性差异(P>0.05),SP阳性表达量非常显著降低(P<0.01);E组VIP的阳性表达量非常显著升高(P<0.01),SP阳性表达量非常显著降低(P<0.01); FE组VIP和SP阳性表达量无显著性差异(P>0.05)。与HE组比较,FE组的VIP和SP阳性表达量无显著性差异(P>0.05),但与E组比较,FE组VIP阳性表达量显著降低(P<0.05),SP阳性表达量非常显著升高(P<0.01)。与C组相比较,HF组和E组VIP/SP的值非常显著升高(P<0.01),FE组无显著性差异(P>0.05);与HF组相比较,FE组VIP/SP的值非常显著降低(P<0.01)。
研究结论:
1、长期高脂饮食使大鼠肠神经分布增多,VIP表达量升高,SP表达量降低,肠神经系统兴奋性和抑制性的协调对抗平衡发生偏移;小肠推进率降低,小肠吸收功能升高;肠肌层和粘膜层变厚;这些变化可能会导致小肠对脂肪过度吸收,诱导体脂含量升高和肥胖发生。
2、中等强度有氧运动使肠神经的分布大幅度增加,VIP表达量升高,SP表达量降低,肠神经系统兴奋性和抑制性的协调对抗平衡发生偏移,且小肠的吸收功能提高,推进率降低,这些变化可能有助于促进运动机体的小肠对营养物质和能量的充分吸收。
3、中等强度有氧运动结合高脂饮食可使大鼠肠神经系统VIP表达量升高,SP表达量降低,小肠吸收功能提高,推进率降低,但幅度均低于高脂饮食和运动的单独影响。提示,运动在一定程度上可回调高脂饮食诱导的肠神经系统兴奋性和抑制性平衡的偏移,降低了胃肠对脂肪的过度吸收。提示运动对肠神经及其介导的胃肠功能具有双向调节作用,对健康机体和高脂饮食机体的调节作用不同,运动可在肠道神经重塑层面上参与抑制高脂饮食诱导的肥胖。