目的（1）探讨miR-219a-5p在etoposide损伤及H₂O₂损伤细胞模型中的表达情况;（2）利用生物信息学筛选出CCNA2和CACUL1是miR-219a-5p的靶蛋白,并探讨蛋白CCNA2和CACUL1在etoposide损伤及H₂O₂损伤模型中的变化趋势;（3）验证蛋白CCNA2和CACUL1是miR-219a-5p的靶蛋白;（4）探寻特异变化的miR-219a-5p在TBI过程中的作用机制,以期为TBI患者的诊断和治疗提供新思路与新方法。方法（1）采用25μmol/L etoposide刺激损伤神经元细胞,并收集在1h,6h,16h,20h,24h时损伤的神经元细胞及对照组细胞内的总RNA。另外,采用150μmol/L H₂O₂损伤神经元细胞,并提取在6h,12h,18h,24h时损伤的神经元细胞及对照组细胞内的总RNA。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应（quantitative Real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）分别分析两种TBI损伤模型中的不同时间点的miR-219a-5p变化。（2）通过生物信息学软件预测miR-219a-5p作用的靶蛋白;采用25μmol/L etoposide刺激损伤神经元细胞,并收集损伤后1h,6h,16h,20h,24h时损伤的神经元细胞及对照组神经元细胞内的总蛋白。另外,采用150μmol/L H₂O₂损伤神经元细胞,并提取损伤后6h,12h,18h,24h时损伤的神经元细胞及对照组神经元细胞内的总蛋白。Western blot分别分析两种TBI损伤模型中的不同时间点的CCNA2和CACUL1蛋白变化。（3）采用荧光素酶报告基因实验及过表达或抑制表达miR-219a-5p后的蛋白变化验证CCNA2和CACUL1是miR-219a-5p的靶蛋白。（4）Western blot分析Akt/Foxo3a信号通路及p53/Bcl-2信号通路的表达情况。结果（1）etoposide损伤模型中,与对照组相比,miR-219a-5p在6h表达上调（p<0.05）,并持续升高至24h;H₂O₂损伤模型中,与对照组相比,miR-219a-5p的表达水平在损伤12h后持续升高（p<0.05）。（2）生物信息学分析显示蛋白CCNA2和CACUL1是miR-219a-5p的靶蛋白;etoposide损伤模型中,蛋白CCNA2和CACUL1在6h表达下调,并持续降低至24h;H₂O₂损伤模型中,蛋白CCNA2、CACUL1的表达水平具有相似的变化趋势。（3）荧光素酶报告基因实验证明miR-219a-5p可分别与CCNA2 mRNA和CACUL1 mRNA的3′-UTR结合;过表达或抑制表达实验再次证明蛋白CCNA2和CACUL1是miR-219a-5p的靶蛋白。（4）etoposide损伤模型中,上调的miR-219a-5p通过抑制蛋白CCNA2和CACUL1的表达,分别进一步调控Akt/Foxo3a及p53/Bcl-2信号通路,进而引起神经元细胞凋亡。结论TBI损伤模型中的miR-219a-5p水平升高,且miR-219a-5p负向调控神经元细胞内的靶蛋白CCNA2和CACUL1,进而调控神经元细胞的凋亡。本实验提示,miR-219a-5p可促进TBI发生与发展,也为TBI的诊疗提供了新思路。