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植物内生真菌多样性丰富,它在同宿主长期进化过程中形成了独特的代谢途径,能产生与宿主相同或类似的化学成分以及其他结构新颖的化合物,是获得新的药用化学成分的资源宝库。为了更好地利用这种微生物资源,本论文以核桃内生真菌为研究对象,对实验室前期分离的菌株进行培养发酵,筛选出具有抗氧化及抑菌活性的菌株,对该菌株的发酵工艺进行优化,比较不同组分的活性,并采用HPLC-MS/MS分析手段鉴定出高活性组分的成分,主要结果如下:(1)以29株核桃内生真菌为研究对象,通过DPPH·清除率、总还原力(FRAP法)评价其抗氧化活性,以对6种植物病原菌的抑制率评价其抑菌活性,筛选出具有研究价值的高活性菌株。结果表明,由核桃青皮中分离得到的须壳孢属内生真菌LTS-6-6表现出较好的抗氧化活性及抑菌效果,在浓度为1 mg/m L时,发酵液总还原力为130.47 mg VC/g,对DPPH·清除率达到96.47%;在试验条件下对小麦赤霉和苹果腐烂病原菌的抑制率达到100%,对水稻纹枯病原菌的抑制率为94.87%。(2)以菌丝干重、总还原力(FRAP法)以及对水稻纹枯的抑制率为评价指标,通过单因素试验及正交试验对高活性菌株LTS-6-6的培养条件进行优化。单因素试验结果表明果糖为碳源,蛋白胨为氮源,可以显著提高LTS-6-6发酵液的抗氧化及抑菌活性。正交试验显示,发酵天数为影响菌丝干重的主要因素,培养基初始p H为影响发酵液抗氧化及抑菌活性的主要因素。使菌丝体产量最大及抑菌活性最好的发酵工艺条件为:23℃、15 d、p H值8.5;使发酵液总还原力最强的发酵工艺条件为:24℃、15 d、p H值8.5。(3)对高活性菌株LTS-6-6浓缩后的发酵液进行萃取,研究不同溶剂萃取物的抗氧化及抑菌活性。试验结果表明乙酸乙酯提取物的抗氧化活性明显高于其他溶剂提取物,而抑菌活性物质集中在乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物中,不同病原菌对同种提取物的响应情况不同。不同溶剂提取物的总还原力与总酚总黄酮之间的相关性系数分别为0.8771、0.9177,HPLC-MS/MS分析结果显示,活性最好的乙酸乙酯提取物中含有多种酚类物质。推测苯甲酸的存在是抑菌活性的主要物质之一,而自由基清除能力则是没食子酸乙酯、槲皮素等多种酚类物质协同作用的结果。(4)以酸值、过氧化值作为考察指标,研究乙酸乙酯提取物对油菜籽油及猪油氧化稳定性的影响。结果显示,在相同的贮藏时间下,添加不同浓度的乙酸乙酯提取物会使油菜籽油和猪油的酸值及过氧化值均有所下降,当浓度达到0.05%时,抗氧化效果与叔丁基对苯二酚(TBHQ)相当。根据反应动力学方程,结合阿伦尼乌兹公式,得到油菜籽油添加0.02%的乙酸乙酯提取物后的氧化动力学模型为0 TCC?(10)-?(28)]t)89.11/10.4845exp[exp(,可预测,20℃下油菜籽油的货架期为99 d,25℃下的货架期为75 d。该研究结果表明核桃内生真菌可以作为筛选天然抗氧化物质以及抑菌物质的来源。菌株LTS-6-6乙酸乙酯提取物在自由基清除方面表现出的活性以及对油脂氧化稳定性的影响,表现出了其应用于食品防腐方面的巨大潜力。