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目的：本研究以小鼠肾小球足细胞MPC-5为模型,研究高糖和糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs)刺激MPC-5后能否增加微囊泡(microvesicles, MV)的产生及其可能机制。方法：以体外培养的MPC-5细胞为实验模型,以30mmM葡萄糖作为高糖组刺激因素、200nM AGEs作为AGEs组刺激因素(刺激时间均为20小时)。抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-Acetyl-L-cysteine, NAC)及a-硫辛酸(alpha lipoic acid, a-LA)作为预处理因素(均提前1小时处理)。1.采用ELISA技术检测MPC-5细胞产生MV的含量。2.以CM-H2DCFDA为探针,采用流式细胞仪检测高糖、AGEs刺激不同时间后细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量的变化。3.以MitoSOXTM为探针,采用流式细胞仪检测高糖及AGEs刺激MPC-5细胞不同时间点后线粒体内ROS含量的变化。4.采用Western Blot技术检测高糖及AGEs刺激MPC-5细胞不同时间点后NOX4蛋白的表达。5.统计学方法：采用SPSS17.0统计软件进行数据处理。结果用均数±标准差(x±s)表示。两组以上比较采用单因素方差分析(ANOVA)。检验水准是a=0.05,P<0.05为差异有统计学意义。结果：1.MV定量检测结果：与对照组相比,30mM葡萄糖与200nM AGEs分别刺激MPC-5细胞20小时后MV产生显著增多(P<0.05),分别为对照组的4.6倍、7.6倍；抗氧化剂NAC预处理1h后,MV含量明显低于高糖组(P<0.05),下降了52.9%, AGEs+NAC组MV含量也明显低于AGEs组(P<0.05),下降了48.9%；a-LA预处理小时后高糖+a-LA组MV含量与高糖组相比无明显变化(P>0.05),AGEs+α-LA组MV含量与AGEs组比也无明显变化(P>0.05)。2.细胞内ROS检测结果：30mmM葡萄糖刺激MPC-5细胞后,细胞内ROS的产生量呈先升高后降低趋势,12小时、24小时、48小时、72小时分别是0小时的1.8、3.0、4.0、2.0倍(P<0.05),可见48小时达高峰,而后逐步下降；200nMAGEs刺激MPC-5细胞后,细胞内ROS的产生量呈先升高后降低趋势,12小时、24小时、48小时、72小时分别是0小时的2.3、3.8、5.2、4.8倍(p<0.05),可见48小时达高峰,而后逐步下降。3.线粒体内ROS检测结果：30mM葡萄糖刺激MPC-5细胞后,线粒体内ROS的产生量呈先升高后降低趋势,4小时、12小时分别是0小时的2.0、1.3倍(p<0.05),可见4小时达高峰,而后逐步下降,在24小时时降低至基线水平200nM AGEs刺激MPC-5细胞后,线粒体内ROS的产生量呈先升高后降低趋势,4小时、12小时分别是0小时的3.3、1.4倍(p<0.05),可见4小时达高峰,而后逐步下降,在24小时时降低至基线水平4.足细胞NOX4蛋白检测结果：与对照组相比,随高糖刺激时间延长NOX4蛋白表达量呈先升高后降低的趋势,4小时、6小时、12小时时分别是0小时的3.0、1.9、1.5倍(p<0.05),可见4小时达高峰,随后逐渐下降,24小时时降低至基础水平；随AGEs刺激时间延长,NOCX4蛋白表达量也呈先升高后降低趋势,12小时、24小时、48小时、72小时时分别是0小时的2.0、3.0、2.2、2.1倍(p<0.05),可见24小时达高峰,随后逐渐下降,72小时时仍处于较高水平结论：1.高糖、AGEs刺激足细胞MPC-5后能显著增加MV的产生2.高糖、AGEs可以通过氧化应激途径刺激MPC-5细胞产生MV。3.高糖、AGEs可能主要通过增加NADPH氧化酶(NOX4)来源的ROS而促进MPC-5细胞产生MV。