牛大力多糖的提取及其药理活性研究

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牛大力是中国南方地区民间广泛采用的药食两用植物。目前为止,国内外文献对其化学成分和药理作用的报道仍比较少。我们提取、纯化了牛大力多糖,测定多糖的理化性质,对其结构进行了初步的表征,并研究牛大力多糖的抗氧化、抗炎、抗肿瘤等药理作用。本论文的研究可为牛大力的开发利用提供基础资料,也为牛大力临床治疗多种疾病提供理论和实验依据。牛大力的活性成分主要在水溶性部分,其水溶性成分含有较多的水溶性多糖,经水煮、醇沉、纯化、冻干得到牛大力多糖,凝胶层析得到牛大力多糖的主要组分。比色法测定牛大力多糖对bab/c小鼠肝匀浆抗脂质的过氧化作用、对抗坏血酸体系羟自由基清除率的影响以及对DPPH·自由基的清除作用;利用流式细胞术测定多糖对Con A刺激引起的小鼠T淋巴细胞增殖的影响;研究多糖对二甲苯所致小鼠耳肿胀动物模型的影响:通过构建小鼠环磷酰胺致免疫低下模型,检测多糖对小鼠溶血素含量及免疫器官指数的影响;利用MTT法和倒置显微镜观察牛大力多糖对Hela细胞生长的影响。用等离子体发射光谱仪测定牛大力药材中元素含量;元素分析仪测定牛大力多糖的元素组成;离子色谱测定牛大力多糖的单糖组成;用红外光谱测定牛大力多糖主要组分的特征吸收;以及利用凝胶色谱测定牛大力多糖主要组分的分子量范围。本实验测定了牛大力药材中19种元素的含量,其中Ca、K、Mg、Al、Fe和Mn等含量较高。牛大力多糖中C、H、N元素组成为:39.45%、6.27%、0.49%。多糖中鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖的组成分别为5.2、59.9、4717.9、25.7和1345.0 mg/kg。通过葡聚糖凝胶G-75层析,得到牛大力多糖主要组分(MSP1)。MSP1具有多糖类的红外特征吸收峰,其分子量范围为:数均分子量(Mn)为6.64×10~3,重均分子量(M_w)为9.05×10~3,分布宽(D)为1.36。牛大力多糖对小鼠T淋巴细胞增殖的作用与浓度相关。终浓度为160μg/ml、0.8m/ml、4mg/ml、20mg/ml的多糖对小鼠T淋巴细胞增殖呈剂量依赖性抑制,而终浓度为5、25、50、125μg/ml的多糖对小鼠T淋巴细胞增殖起促进作用,但剂量依赖关系不明显。牛大力多糖能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀(P<0.01或P<0.05);有效提高环磷酰胺致免疫低下小鼠的溶血素含量(P<0.01或P<0.05)并增加免疫器官的重量;牛大力多糖还能够有效抑制Hela细胞生长。抗脂质过氧化和清除·O H自由基能力由强到弱的次序为:牛大力水提物>牛大力醇提物>牛大力多糖:对DPPH·自由基清除能力的次序为:牛大力醇提物>牛大力水提物>牛大力多糖。牛大力多糖具有较明显的抗炎、免疫调节作用,并且具有一定抗氧化和清除自由基作用。牛大力多糖是一种具有多种药理作用和良好保健功效的天然产物,值得进一步开发利用。
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