贵州省部分地区手足口病流行病学及病原学研究

来源 :贵州医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:ni00ni
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目的:1.收集贵州省部分地区2015-2017年手足口病病人的临床资料,整理分析手足口病人的流行特征,分析发病在性别、年龄、入院情况、发病时间、病程等特点,了解贵州省手足口病的变迁的规律。2.收集2015-2016年贵州省手足口病人肛拭子,采用荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative PCR,qPCR)筛选出目的样本,分析贵州省内引起手足口病的病原构成及优势型别,为贵州地区的手足口病的预防及基础研究提供科学依据。方法:1.收集2015-2017年贵阳市公共疾病救治中心住院部手足口病人的资料,采用Excel、spss19.0、Adobe image软件分析发病人群的性别、年龄、入院病情、发病时间、病程的临床数据。2.采用荧光定量PCR筛选出肠道病毒(Enterovirus,EV)阳性,同时EV71和CVA16阴性的肛拭子,接种感染RD细胞后收集出现细胞病变的样本,用逆转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)进行VP1基因扩增,将450bp目的条带送往公司测序,获得序列用Clustalx进行完全比对,使用MEGA6构建系统发育树。结果:1.2015-2017年收集临床诊断手足口病例共35074份,男性和女性比例为1.43:1(男20644:女14430份),年龄趋势(1岁:12840例,2岁:6625例,小于1岁:6450例),入院病情(一般(普通):20283例、急:4例、重症:1154例、危急(危重):13628例),发病时间(5月:20.5%(1876/9144)、17.9%(2187/12214)、15.3%(2105/13716);6月23.0%(2106/9144)、17.9%(2181/12214)、14.5%(1995/13716)),病程(1-136天,平均6天)。2.2015-2016年共收集符合实验要求的样本389份,出现CPE现象的样本200份,RNA提取成功的有121份,有目的条带的样本56份。3.经过生物信息学分析,分离到34株其他肠道病毒包括CVA2、CVA9、CVB6、E11、E17各占2.9%(1/34),CVA5、CVA7、CVB4各占5.9%(2/34),CVB1、CVB3各占8.8%(3/34),CVA10占11.8%(4/34),E7占17.6%(6/34),CVB5占20.6%(7/34),共13种型别。4.1株新型肠道病毒的EVB80与约旦分离的AY843310.1具有同源性,且核苷酸相似性为89%。与云南分离到的HQ538455.1、JF798682.1、LC167443.1核苷酸相似性分别为95%-96%,与山东的JX644073.1核苷酸相似性为97%,与印度分离的HQ664109.1、JN204077.1、JX476193.1、JX476194.1、JX513593.1、JX513594.1、JX513595.1、KF413031.1核苷酸相似性为85%-89%,与孟加拉国分离的JX538168.1的核苷酸相似性为88%。结论:1.2015-2017年贵州省部分地区手足口流行特征,发病率男性高于女性,发病高峰期为5月和6月。入院病情以一般(普通)为主,病程6天。2.1.2015-2016年间共分离到的34株其他肠道病毒中CVB5为优势型别,占20.6%(7/34)。3.获得1株新型肠道病毒EVB80,其同源株为AY843310.1,与山东JX644073.1核苷酸相似性最高。3.2015-2016年间共分离到的34株其他肠道病毒中包括CVA2、CVA9、CVB6、E11、E17、CVA5、CVA7、CVB4、CVB1、CVB3,CVA10、E7、CVB5共13个型别,贵州省部分地区导致手足口病的病毒型别成多样性,应该加强肠道病毒其他型别的检测及基础研究,为手足口病的防治提供科学有效的实验数据。
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