藏药短穗兔耳草化学成分与活性研究

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目的:对藏药短穗兔耳草30%乙醇部位进行化学成分分离纯化,鉴定单体化合物,研究化合物体外XOD抑制活性及抗氧化活性。方法:(1)采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、HPLC等方法对30%乙醇部位进行了系统的化学成分分离及纯化,并根据其理化性质以及现代波谱学技术(包括氢谱碳谱、紫外、红外、质谱等)鉴定这些化合物的结构。(2)以XOD为靶标,以黄嘌呤为底物,在体外对各化合物与XOD结合的最佳反应条件进行筛选,并用阳性药物别嘌呤醇验证最佳反应条件。用筛选出来的最佳反应条件对已经鉴定的化合物进行XOD抑制活性的实验。(3)采用DPPH法,ABTS法评价了短穗兔耳草中分离纯化的化合物的抗氧化活性能力。结果:(1)从短穗兔耳草乙酸乙酯萃取部位的30%乙醇部位中共鉴定出17个化合物,分别为6个苯乙醇苷类化合物:lagotisideB(2),hemiphroside B(3),车前草苷D(4),Plantamajoside(5),2′-O-acetylplantamajoside(6),acteoside(7);5个环烯醚萜苷类化合物:Scutellariosid II(8),Globularimin(9)Baldaccioside(10),10-O-反式-异阿魏酰基梓醇(11),8-epi-loganic acid(12);3个黄酮类化合物:木犀草素(13),木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14),小麦黄素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15),4个其他类化合物:lagotisideC(1),苯甲醇-O-(2′-O-β-D-吡喃木糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(16),肉桂酸(17)。其中1,2为新化合物;3,4,6,10,11,16为兔耳草属首次分离得到;5,7,8,9,12为短穗兔耳草首次分离得到。(2)化合物4,13,14对XOD活性有较好的抑制作用,其中化合物13对XOD活性抑制能力和阳性药无显著差别;化合物14在化合物13基础上接连个葡萄糖,虽然也有显著抑制活性能力但与化合物13相比抑制性较弱;化合物4与化合物14相比抑制XOD活性的能力较强。化合物1,2,3,5,6,7,10,12,16,17抑制XOD活性能力弱于上面三个化合物。(3)化合物3,4,11,13有较强的清除DPPH的能力,1、2、5、6、7、8、9、10、12、15、16、17清除DPPH的能力较弱。化合物3,4,11,13,14有较强的清除ABTS的能力,化合物9,10有稍强的清除ABTS的能力,化合物1、2、5、6、7、8、12,15、16、17清除ABTS的能力较弱。结论:本课题研究了短穗兔耳草30%乙醇部位的化学成分,并对其进行XOD抑制活性的研究以及化合物的抗氧化活性能力。对短穗兔耳草30%乙醇进行化学成分分离,得到17个化合物,其中3个化合物对XOD有较强的抑制作用;4个化合物抗氧化活性IC50值小于阳性药VC,可知其抗氧化活性强于阳性药VC。这项研究为抗痛风药的研究提供依据,同时筛选出的化合物可以作为天然抗氧化剂,减少合成氧化剂的毒副作用,为临床应用提供理论依据。
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