论文部分内容阅读
FtsH(filamentation temperature sensitive H)与细胞内诸多代谢活动和发育进程相联系。许多来自原核生物和真核生物的研究都表明,FtsH与热激、高渗、光胁迫、冷诱导、病害逆境胁迫有着不可分割的联系。目前虽然在原核生物中对FtsH蛋白酶基因功能有了较深入的研究,但对植物中FtsH蛋白的功能还不清楚。本论文对拟南芥中FtsH蛋白AtFtsH3和AtFtsH9功能进行了初步工作,取得了以下主要结果: 1、利用RT-PCR方法检测AtFtsH3和AtFtsH9在拟南芥不同组织和器官中表达水平的表达,结果表明AtFtsH3和AtFtsH9的表达无组织特异性,其在根、茎、花、茎生叶、莲座叶和幼嫩的角果中均能检测到表达,其中AtFtsH3在花和未成熟角果中的表达水平最高,AtFtsH9在莲座叶中的表达水平最高。 2、利用组织化学定位GUS染色法,发现在pAtFtsH9::GUS转基因植株中茎生叶和莲座叶检查到比较强烈的GUS表达,而在的角果表达最弱,这些结果和上述的利用RT-PCR的方法对AtFtsH9的组织特异性表达进行检测的结果一致。 3、在正常培养条件下,AtFtsH3突变体(ftsh3)、AtFtsH3过表达植株(OEFtsH3)、AtFtsH9突变体(ftsh9)生长的各个阶段和WT相比较没表型差异。 4、在不同浓度的SA、ABA、MV、H2O2、NaCl、NoSugar的平板上,AtFtsH3各基因型在种子萌发和子叶变绿上和WT差不多,且在正常条件下和经过H2O2处理ftsh3、ftsh9均和WT体内的H2O2和O2-含量没差异。 5、利用:RT-PCR分析了AtFtsH9基因在不同胁迫条件下的基因表达水平,结果表明:机械损伤后该基因表达量明显上调,该基因也受H2O2诱导。 6、通过生理实验研究ftsh9在机械损伤条件下的表型发现:pAtFtsH9::GUS植株在伤口处的GUS表达强烈,受伤处理后ftsh9中的H2O2和O2-含量均高于WT。 7、通过生理实验研究ftsh9在H2O2处理条件下的表型发现:ftsh9与WT在萌发率、子叶变绿、存活率以及根长方面并无差异。但是将在MS生长4天后的苗移至不同浓度H2O2平板后,ftsh9存活率高于WT。 8、通过生理实验研究fish9在其他处理条件下的表型发现:在MeJA、CdCl2、CuSO4板上,ftsh9与WT在萌发率和子叶变绿方面并明显无差异。取22天的离体叶片用SA、H2O2处理,两者也无明显差异。